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鱼藤素是除鱼藤酮之外植物中最常见的鱼藤酮类化合物,鱼藤素的实验研究已证实在治疗恶性肿瘤,尤其是肺部肿瘤方面具有显著的抑制癌细胞增殖、改善症状等功效,且毒副作用极小。本课题选取鱼藤的鱼藤根为研究对象,旨在探索鱼藤素提取、纯化的最佳工艺;改进和优化鱼藤素的检测手段;采用高速逆流色谱等新工艺新手段进一步提高鱼藤素的提取率和纯度,为以后进一步的药理毒理研究提供材料,并对鱼藤素分子进行稳定性分析和还原研究。主要研究结果如下:1.鱼藤的提取条件优化采用正交设计探讨提取液,料液比,超声处理时间,提取时间等因素对鱼藤素提取含量的影响,寻找最佳的提取工艺。最终确定总黄酮提取的优化工艺为:用30倍原料药的氯仿和甲醇4:1混合溶剂作为提取溶剂,超声波提取3次,每次超声处理时间为500S。2.鱼藤根总黄酮的HPLC分析条件优化鱼藤根提物中主要含有鱼藤酮和鱼藤素,两者性质极为相似难以分离和检测,本方法优化改进了鱼藤酮和鱼藤素的HPLC检测方法,流动相改为乙腈和水,洗脱方式为梯度洗脱,色谱条件:waters SunFire C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)、流动相为A(乙腈)和B(0.1%三氟乙酸)混合梯度洗脱:0-8minA(55%-65%);8-11minA(65%-70%);11-15minA(70%-90%)。流速为1mL/min、柱温为25.0℃,进样量为10μL。此方法较之传统的检测方法,有效避免了色谱峰的拖尾现象及两种物质分离度低等问题,可以精确测定鱼藤素的含量及纯度。3. HSCCC分离条件优化提取浸膏中主要成分为鱼藤素和鱼藤酮两者性质极为相近,采用传统分离手段很难将其分离获得鱼藤素,采用高速逆流色谱技术以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(体积比为7:0.5:5:3)为两相溶剂系统,在主机转850r/min、流速2.0mL/min、检测波长254nm条件下进行分离制备,可制备纯度在95%以上的鱼藤素。本方法分离时间短,分离量大,样品无损失,溶剂回收率高。4.确定鱼藤素稳定性鱼藤素鱼藤素耐光性较差,故应避光保存。鱼藤素有较强的耐热性及耐超声波性,长时间加热及超声处理均未使其结构发生改变。鱼藤素具有良好的耐酸性,在碱性条件下鱼藤素的分子结构迅速发生改变。5.鱼藤素还原条件优化鱼藤素可以被硼氢化钠还原为羟基鱼藤素,升高温度有利于加速反应进程,在超声波作用下反应时间大大缩短,适当增加超声功率和减小超声频率都能使还原反应在极短时间内完成。在超声频率为30kHz,功率为450W的情况下鱼藤素的还原时间最短。