蜂胶中咖啡酸苯乙酯基于JNK和NF-κB炎症通路改善胰岛素抵抗

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中国糖尿病人口位居全球之冠,其中Ⅱ型糖尿病(T2DM)占90%,寻找具有改善T2DM和胰岛素抵抗生物活性的天然产物成为了辅助治疗T2DM的重要发展趋势。本文选择天然产物—蜂胶为考评对象,研究蜂胶中活性化合物基于炎症通路改善糖脂代谢紊乱的作用机制,得到如下结论:  (1)中国三大蜂胶产地中,长白山蜂胶的黄酮及酚酸类化合物的含量最高,黄酮总含量为56.85±1.21mg/g,酚酸化合物总含量为44.25±0.06mg/g;其中,长白山蜂胶中含量最高的三个化合物为高良姜素28.38±1.52mg/g、白杨素24.73±2.10mg/g和咖啡酸苯乙酯(CAPE)37.96±0.14mg/g。  (2)蜂胶中氟胺氰菊酯的残留量为1.1±0.01mg/kg,超过了农业标准里的最高残留标准,而其他杀螨剂未检出;有机氯农药中α-666的残留量为0.043±0.003mg/kg,其余有机氯农药未检出;铅的残留量为0.046±0.002mg/kg,砷的残留量为0.038±0.001mg/kg,均不超过农业标准。  (3)在蜂胶的三种活性化合物中,通过3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶模型筛选出CAPE抑制HMG-CoA还原酶能力最强,抑制率为34.31±1.61%。通过HepG2细胞模型筛选出CAPE抑制葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)mRNA的表达能力最强。说明在蜂胶中CAPE是蜂胶中具有改善糖脂代谢紊乱效果最佳的活性化合物。  (4)利用高糖和棕榈酸诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型细胞。CAPE在胰岛素抵抗细胞模型中改善了细胞葡萄糖消耗与吸收能力;显著提高了糖原合成量;降低了G6Pase的表达和氧化应激介质活性氧(ROS)的含量;促进了胰岛素受体底物(IRS)-1与蛋白激酶B(Akt)蛋白的磷酸化,抑制c-Jun氨基末端激酶(JNK)和核因子(NF)-κB p65蛋白的磷酸化和NF-κB p65的核转移。说明在体外,CAPE通过JNK和NF-κB的炎症信号通路改善了胰岛素抵抗。  (5)通过高脂饮食和链脲佐菌素(STZ)诱导C57BL/6J小鼠建立T2DM模型小鼠。5周后与对照组相比,CAPE在T2DM小鼠模型中减缓了小鼠的体重增长和进食量;显著降低了血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)含量和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);明显增加了小鼠的高密度脂蛋白胆周醇(HDL-c)含量和过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPAR-α)含量;降低了促炎细胞因子—肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6和单核细胞趋化蛋白(MCP)-1含量;抑制了组织中的TNF-αmRNA的表达,激活IRS-1与Akt蛋白的磷酸化,抑制JNK、NF-κB p65蛋白的磷酸化与NF-κB p65的核转移,进一步说明CAPE改善T2DM是通过抑制JNK和NF-κB炎症信号通路实现的。
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