【摘 要】
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在当前有关毛囊损伤修复的研究中,研究者们希望替代较难获得却又在毛囊生成过程中十分重要的毛乳头细胞,如采用其它细胞定向诱导形成的毛乳头样细胞代替毛乳头细胞参加与表皮
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在当前有关毛囊损伤修复的研究中,研究者们希望替代较难获得却又在毛囊生成过程中十分重要的毛乳头细胞,如采用其它细胞定向诱导形成的毛乳头样细胞代替毛乳头细胞参加与表皮细胞的相互作用,从而重建毛囊结构。成纤维细胞体外分离技术及培养的条件相对较简单,已有研究表明,在相关诱导基因过表达或者加入特定诱导因子的条件下,成纤维细胞可以获得促进毛发生长的能力。但传统平板2D培养中,成纤维细胞基本不表达毛乳头细胞相关基因,也不具有促进毛囊再生的能力。海藻酸钠作为一种具有高生物相容性、良好的生物降解性的生物材料被广泛应用。本研究中将利用其水凝胶的特性,把一定数量的成纤维细胞包埋在由海藻酸钠水凝胶所构成的、相对稳定的三维空间中,以模拟生物体内毛乳头细胞的3D微环境。水凝胶可以满足细胞代谢和迁移的需求,又可以为细胞提供三维的生长环境。依据观察到的包埋后成纤维细胞基因表达的情况,探究包埋体积、密度、培养时间等对微球中的成纤维细胞表达毛乳头细胞相关基因的影响。本文中的主要工作包括:1、确定静电喷雾参数,包括电压、水凝胶浓度、推进泵速度等控制微球大小和形貌,制备直径约300 μm的海藻酸钠微球用于包埋人类真皮成纤维细胞;2、制备细胞密度不同的海藻酸钠微球,以探究细胞密度及微球培养时间对毛乳头细胞标志基因表达的影响;3、选定合适细胞密度的包埋体系培养成纤维细胞,并进行动物实验,观察其能否在裸鼠体内促进毛囊结构的生成,以验证其是否在动物模型中具有促进毛囊再生的能力。
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