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目的:1.观察小檗碱(berberine,BBR)对大鼠佐剂性关节炎(adjuvant-induced arthritis,AA)的治疗作用;2.明确BBR发挥抗关节炎的作用和机制与调控M1/M2型巨噬细胞平衡有关。方法:弗氏完全佐剂(complete Freund adjuvant,CFA)制备AA大鼠模型。实验分组为正常组、AA模型组、BBR(40 mg/kg,80 mg/kg,160 mg/kg)剂量组和甲氨蝶呤(methotrexate,MTX,0.5 mg/kg)剂量组。通过动物关节炎评分表对大鼠全身表现、多发性关节炎指数、关节炎肿胀数进行评分,大鼠足趾容积测量仪检测足爪肿胀度的变化;小动物活体成像中X射线检测骨质破坏情况;称重并计算胸腺和脾脏指数;CCK-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测大鼠胸腺T淋巴细胞增殖情况;苏木精-伊红染色观察大鼠脾脏和踝关节病理变化;流式细胞术检测脾脏T细胞亚群;中性红吞噬实验检测巨噬细胞吞噬功能;酶联免疫吸附法检测细胞因子浓度;免疫荧光法检测诱导型一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,iNOS)和精氨酸酶1(arginase 1,Arg1)的表达情况;免疫印迹法检测iNOS、Arg1、腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)、p-AMPK、p65(RelA)、p-p65、核因子κB抑制蛋白α(NF-κB inhibitor alpha,IκBα)、p-IκBα和环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的蛋白表达情况。结果:1.BBR对AA大鼠的治疗作用BBR给药后可明显改善AA大鼠全身炎症反应,降低全身表现评分、减轻足爪肿胀度,减少多发性关节炎指数及关节肿胀数;X射线结果表明,BBR可以明显缓解AA大鼠骨质破坏的情况;组织病理结果显示,BBR减少AA大鼠踝关节滑膜细胞增生、血管翳形成、炎性细胞浸润及软骨侵蚀;同时,BBR还可改善AA大鼠脾脏红髓充血,减少白髓及边缘区增生;BBR显著降低胸腺和脾脏指数;BBR明显降低血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-2、IL-17A、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)的水平,增加转化生长因子-β1(transforming growth factor-β,TGF-β1)、IL-4、IL-10的水平。2.BBR对AA大鼠巨噬细胞功能和极化的影响BBR降低巨噬细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6、MCP-1的水平,增加IL-10、TGF-β1的水平;抑制巨噬细胞的吞噬功能;减少巨噬细胞中iNOS、COX-2表达,增加Arg1的表达,这些结果表明BBR减少M1型巨噬细胞,促进M2型巨噬细胞极化。3.BBR对AA大鼠T淋巴细胞的影响BBR明显抑制T淋巴细胞增殖能力;对CD3~+CD4~+总T细胞、CD4~+CD44~+记忆T细胞比例无明显影响,增加CD4~+CD62L~+初始T细胞比例,BBR(80 mg/kg,160 mg/kg)显著降低CD4~+CD25~+活化T细胞比例;BBR明显减少Th17细胞比例,BBR(80 mg/kg,160 mg/kg)显著提高Treg细胞比例。4.BBR激活AMPK抑制NF-κB信号通路调控巨噬细胞极化AA大鼠腹腔巨噬细胞p-AMPK表达明显降低,p-p65、p-IκBα表达显著增加;BBR(80 mg/kg)可明显上调巨噬细胞p-AMPK的表达,降低p-p65和p-IκBα的表达。结论:1.BBR减轻AA大鼠的关节炎症和骨质破坏,发挥良好的治疗作用;2.BBR抑制AA大鼠M1型巨噬细胞极化,促进M2型巨噬细胞极化;3.BBR抑制T淋巴细胞的增殖和活化,调节Th17/Treg细胞的平衡;4.BBR调控巨噬细胞极化的作用机制与AMPK/NF-κB信号通路有关。