口岸截获小蠹科昆虫DNA条形码技术研究

来源 :南京林业大学 | 被引量 : 18次 | 上传用户:xuebin0523
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
小蠹科(Scolytidae)昆虫是重要的林木害虫,其分布广,种类多,危害重,在进出口的木材和木质包装货物中经常被截获。然而在植物检疫工作中,往往截获的为卵期、幼虫期的虫体或者是肢体残缺的成虫,依据传统的昆虫形态学进行鉴定存在一定的困难和局限,因此需要探索新方法来解决这一难题。随着分子生物学技术在昆虫分类、系统进化等方面的广泛应用,基于线粒体COⅠ基因的DNA条形码技术成为近年来鉴定昆虫的一项新技术,为探讨该技术在小蠹科昆虫分子鉴定方面的应用,本项研究分别进行了小蠹科昆虫基因组DNA提取方法,基于线粒体COⅠ基因的DNA条形码技术及基因条码库构建等内容的研究,研究结果如下:1.选择经典的酚仿抽提法、改良的CTAB法、SDS法及动物组织/细胞基因组DNA提取试剂盒(即磁珠法)4种方法提取小蠹基因组DNA,对提取的基因组DNA进行分光光度值的测定以及COⅠ基因扩增。4种方法均可从单头标本中提取基因组DNA;对于75%酒精浸渍2年的标本,4种方法亦均可提取基因组DNA,保存时间超过2年的浸渍标本,仅磁珠法可以提取;而且磁珠法适合于微量组织基因组DNA的提取。2.通过分析已扩增的序列,自行设计了适合小蠹科昆虫扩增的一对引物,将该引物与通用引物结合,对基因组DNA进行巢氏PCR扩增,成功扩增82种小蠹虫的COⅠ基因,说明该引物具有扩增小蠹虫基因组DNA的通用性。3.以齿小蠹属(Ips)、大小蠹属(Dendroctonus)和材小蠹属(Xylebrous)昆虫为研究对象,扩增相同位置的COⅠ基因片段,研究其遗传距离和系统进化关系。结果表明:种内的遗传距离小于种间的遗传距离,且同一物种处于分子系统进化中的同一支系,证明该COⅠ基因片段可以作为小蠹虫的DNA条形码进行分子鉴定。4.基于COⅠ基因片段的DNA条形码技术作为蠹虫的分类鉴定的新方法,综合扩增截获小蠹的COⅠ基因片段,初步构建小蠹科3个亚科22属82种142个小蠹的基因条码库,为植物检疫工作中的小蠹虫分子鉴定提供理论和数据基础。
其他文献
<正>浙江省台州市黄岩区委统战部倾力打造"同心.文化传播集团",以文化聚人心强实力,提高企业的核心竞争力,推进非公有制企业文化阵地的新发展新繁荣。"同心.文化传播集团"是
目的:探讨韧带样型纤维瘤病的CT特征。方法:回顾性分析15例经手术病理证实的韧带样型纤维瘤病CT表现,并与病理结果对照。结果:15例韧带样型纤维瘤病表现为腹壁或腹内软组织肿块,
设计实现了一个数字幅频均衡的功率放大器。该系统分为前置放大器、带阻网络、FPGA数字处理模块、功率放大器等模块组成。测试结果表明,该数字幅频均衡功率放大器具有高增益、
<正>编辑同志:我表妹和丈夫杨某几年前结婚,因婚后表妹长期未生育,导致夫妻感情日渐冷淡。去年,杨某在外面结识了某公司职员小玲,小玲年轻漂亮,两人很快便产生婚外情,并在外
亚硝酸盐是肉制品中常用的食品添加剂,具有发色、抑菌、改善风味和质构等作用,特别是亚硝酸盐能够有效的防止肉毒梭状杆菌的生长,但是亚硝酸盐具有毒性,亚硝酸根与肉类中的胺
目的:分析北京市某郊区的民营医院发展现状,探讨该郊区民营医院发展对策。方法:根据2013年北京市《医疗卫生机构年报表》及定性访谈结果,分析某郊区民营医院基本情况、规模、
唐传奇中的婚恋小说真实地再现了唐代社会的婚恋状况,反映了唐人的爱情理想、道德观念和价值取向。唐代婚恋观带有明显的现实功利性:情可以被张扬到极致,但它终究要回归礼,即
本文从背景、市域基本条件、工业发展状况、存在问题及应对措施几方面探讨了洪湖市域空间发展规划研究,希望能通过对洪湖市域空间发展规划的研究与探索,促进洪湖市社会经济与
在元杂剧中,有大量光彩照人的女性形象出现。这些女性形象涉及范围极广,从最下层的妓女、平民到上层社会中的官宦小姐、宫廷后妃等等。本文将按身份地位的不同对元杂剧中的女
脂肪细胞因子是心血管并发症的重要调节因子。其中,脂联素是脂肪细胞分泌的重要血管保护因子。肥胖、糖尿病及冠心痛患者脂联素水平显著降低,低脂联素血症是动脉粥样硬化发生