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小蠹科(Scolytidae)昆虫是重要的林木害虫,其分布广,种类多,危害重,在进出口的木材和木质包装货物中经常被截获。然而在植物检疫工作中,往往截获的为卵期、幼虫期的虫体或者是肢体残缺的成虫,依据传统的昆虫形态学进行鉴定存在一定的困难和局限,因此需要探索新方法来解决这一难题。随着分子生物学技术在昆虫分类、系统进化等方面的广泛应用,基于线粒体COⅠ基因的DNA条形码技术成为近年来鉴定昆虫的一项新技术,为探讨该技术在小蠹科昆虫分子鉴定方面的应用,本项研究分别进行了小蠹科昆虫基因组DNA提取方法,基于线粒体COⅠ基因的DNA条形码技术及基因条码库构建等内容的研究,研究结果如下:1.选择经典的酚仿抽提法、改良的CTAB法、SDS法及动物组织/细胞基因组DNA提取试剂盒(即磁珠法)4种方法提取小蠹基因组DNA,对提取的基因组DNA进行分光光度值的测定以及COⅠ基因扩增。4种方法均可从单头标本中提取基因组DNA;对于75%酒精浸渍2年的标本,4种方法亦均可提取基因组DNA,保存时间超过2年的浸渍标本,仅磁珠法可以提取;而且磁珠法适合于微量组织基因组DNA的提取。2.通过分析已扩增的序列,自行设计了适合小蠹科昆虫扩增的一对引物,将该引物与通用引物结合,对基因组DNA进行巢氏PCR扩增,成功扩增82种小蠹虫的COⅠ基因,说明该引物具有扩增小蠹虫基因组DNA的通用性。3.以齿小蠹属(Ips)、大小蠹属(Dendroctonus)和材小蠹属(Xylebrous)昆虫为研究对象,扩增相同位置的COⅠ基因片段,研究其遗传距离和系统进化关系。结果表明:种内的遗传距离小于种间的遗传距离,且同一物种处于分子系统进化中的同一支系,证明该COⅠ基因片段可以作为小蠹虫的DNA条形码进行分子鉴定。4.基于COⅠ基因片段的DNA条形码技术作为蠹虫的分类鉴定的新方法,综合扩增截获小蠹的COⅠ基因片段,初步构建小蠹科3个亚科22属82种142个小蠹的基因条码库,为植物检疫工作中的小蠹虫分子鉴定提供理论和数据基础。