【摘 要】
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为探索piggyBac转基因系统在鱼类转基因研究中的应用,利用精子介导法将带有GFP基因的转座子载体pigA3GFP与辅助质粒helper一起导入人工授精的泥鳅卵中,在G0代获得发绿色荧光
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为探索piggyBac转基因系统在鱼类转基因研究中的应用,利用精子介导法将带有GFP基因的转座子载体pigA3GFP与辅助质粒helper一起导入人工授精的泥鳅卵中,在G0代获得发绿色荧光的泥鳅。PCR及DNA斑点杂交检测结果证实鱼的基因中已带有外源GFP基因。进一步地我们在pigA3GFP质粒基础上构建了转基因载体pigA3GFP- Promoter-DsRed PolyA,DsRed用来自团头鲂(Megalobrama amblycephala) Actin启动子驱动,并在其后加有来自家蚕丝素蛋白轻链基因Poly (A)的加尾信号序列。通过脂质体转染法将该载体和辅助质粒helper混匀后导入BmN细胞。细胞培养72h后,开始发现同时发绿色和红色荧光的家蚕细胞。结果表明来自团头鲂的Actin启动子能驱动DsRed在家蚕细胞中表达。
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