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水产品因其高蛋白、低脂肪、营养丰富、美味可口而备受人们青睐,但有毒有害因素对水产品的污染严重威胁其安全性,影响公众健康和社会稳定,已成为国内外高度关注的食品安全问题。致病性弧菌是污染水产品最主要的致病菌,广泛存在于海水、淡水及其水生动物中,是引起夏季沿海地区食物中毒事件的首要食源性致病菌。
致病性弧菌快速检测、监测、控制及评价技术是当前急需的水产品安全关键技术。选择性鉴别培养基作为致病性弧菌快速筛检重要技术,将传统的细菌分离与生化反应有机的结合起来,使得检测结果直观,易于观察辨别,且具有低成本、特异性强、灵敏度高和操作方便等优点,是国内外微生物检测发展的一个主要发展方向。
本文以水产品中四种致病性弧菌:副溶血性弧菌、溶藻弧菌、麦氏弧菌和鲨鱼弧菌为研究对象,开展了四种致病菌的选择性鉴别培养基的设计与研究,以期开发出一套快速、简便的用于同时对4种目标致病性弧菌的快速检测产品与技术,以满足日益严格的食品安全标准和不同检测条件的需求。
基于4种弧菌的基础营养和特殊生态环境需求,分别优化其增菌培养基及培养条件;基于4种弧菌的生态学、酶系统、代谢途径及其对多种特殊抑菌物质的耐受程度等,改进一种副溶血性弧菌显色鉴别培养基(mVpCM),设计研发专门以筛检溶藻弧菌为唯一目标菌的溶藻弧菌选择性鉴别培养基(VaDM)、以筛检麦氏弧菌为唯一目标菌的麦氏弧菌选择性鉴别培养基(VmDM)、以筛检鲨鱼弧菌为唯一目标菌的鲨鱼弧菌选择性鉴别培养基(VcDM),并对4种培养基的特异性、灵敏性和检测效果进行了初步评价。
实验结果显示:通过增菌培养基与选择性鉴别培养基结合检测4种重要致病性弧菌的方法,与常规方法(TCBS结合法国梅里埃细菌鉴定系统API20E试剂条或弧菌科生化鉴定管)相比,提高了目的菌的检出率,缩短了检测所需时间,检测结果直观,易于观察,特异性强、灵敏度高,且降低检测成本,减少工作量,操作简便,具有更高的检测效率和鉴别能力,为构建同时快速筛检12种致病性弧菌的增菌和选择性鉴别培养基系统做了部分工作。