本文从以下两个方面进行了研究：1.首先建立OVA66基因高表达体系，检测OVA66高表达对肿瘤细胞系SMMC-7721和正常细胞系WISH生物学功能的影响；2.应用RNA干扰的原理和方法，阻断OVA66基因在高表达肿瘤细胞Hela中的表达后，建立OVA66基因低表达体系，观察其对肿瘤细胞生物学功能的影响。 一、高表达OVA66基因对细胞生物学功能的作用 　　从人睾丸组织中，扩增得到OVA66基因，定向克隆于真核表达载体pcDNA3.1中，重组载体经酶切鉴定和测序分析后转染于OVA66基因低表达的肿瘤细胞SMMC-7721中，基因转入后经过G418筛选，得到稳定表达株。电镜检测显示，转染pcDNA3.1-OVA66的7721核畸形明显，常染色质增多，胞浆核糖体丰富，表明细胞增殖代谢增快；细胞表面突起明显增多，表明其运动能力发生变化。 　　二、RNAi阻断OVA66基因表达对肿瘤细胞生物学功能的作用 　　本实验应用RNAi原理，通过构建表达小干扰RNA的载体，特异性阻断细胞内目的蛋白表达，筛选出稳定细胞系，为基因功能研究奠定基础。。 　　组织学分析发现，对照组肿瘤细胞呈浸润性生长，而实验组肿瘤细胞呈局限性生长，受到包膜束缚。RT-PCR、免疫组化、免疫荧光实验证实在实验组中OVA66基因、蛋白表达均对低于照组，表明shRNA载体在体内可有效发挥基因阻断功能。