青鳉（Oryzias sakaizumii and Oryzias latipes）与其他硬骨鱼类不同,具有明确的XX/XY性别决定系统,是研究硬骨鱼类性别决定与性别分化的良好实验模型,具有胚胎透明发育易观测,性成熟生长周期短,基因组小等优点。青鳉Y染色体上的dmy基因是雄性决定基因,通过调控常染色体上的gsdf,dmrt1等因子启动未分化性腺向精巢发育。常用的两种品系:Hd-rR（Oryzias latipes）和HNI（Oryzias sakaizumii）,虽然都由雄性性别决定因子dmy决定性腺的雄性分化,但之前已有报道,二者之间孵化期生殖细胞数量,dmrt1和gsdf的表达都有显著差异,雄激素处理后两种品系的应答机制不同,提示可能有不同的信号调控生殖细胞的雄性分化。Gsdf（性腺体细胞衍生因子）基因是生长转化因子TGF-β超家族中的一员。转化生长因子β超家族由大量结构相关因子组成,包括TGF-β、骨形态发生蛋白（BMP）、抗苗勒管激素（AMH）、激活素和抑制素。TGF-β信号传导控制多种细胞过程,例如细胞增殖,识别,分化,凋亡和发育。从苍蝇和蠕虫到哺乳动物,在胚胎发生期间以及在组织成熟期间都发挥至关重要的作用。研究表明gsdf存在于硬骨鱼类,且在硬骨鱼类中很保守,作为dmy的下游基因,调控雄性性腺分化。实验室发现HNI和Hd-rR青鳉对gsdf缺失的应答反应不同,在Hd-rR品系中,gsdf的缺失导致XY型青鳉雌性化,且突变体腹部肿大,卵巢体积较大,只有很薄的一层生殖细胞壁,卵细胞发育不正常,大部分卵细胞只有初级卵母细胞,卵巢成熟后也很难排卵,产卵率和受精率都很低;在HNI品系中,gsdf的缺失未导致XY型青鳉雌性化,但突变体仍腹部肿大,精巢体积较大,部分精巢从远端到近端结构紊乱,没有明显的远端到近端的结构区分,生殖细胞增加。根据这一有趣的现象,我们分别取Hd-rR品系一月龄野生型精巢RNA、一月龄野生型卵巢RNA、一月龄敲除型巨大卵巢RNA与HNI品系一月龄敲除型巨大精巢RNA,进行转录组差异分析,筛选出RNA结合蛋白Igf2bp3的表达存在差异,在敲除型卵巢中的表达远远高于野生型卵巢,表达量是野生型卵巢表达量的10倍,相反在敲除型精巢中表达量很少,远低于野生型卵巢。目前对于igf2bp3的研究多数在哺乳动物的癌症方面以及生物的生长、发育、新陈代谢等方面的研究,在鱼类的研究还比较少,本研究首次克隆了igf2bp3基因,利用RT-PCR、QPCR、荧光双色免疫组化和荧光双色原位杂交等技术手段探究了igf2bp3在青鳉性腺和胚胎中的mRNA表达以及亚细胞定位。结果显示igf2bp3 mRNA在青鳉脑子、肝脏、卵巢和精巢中均有表达,其中卵巢表达量最高;在胚胎发育的各个时期均有表达。Igf2bp3蛋白高表达于敲除型卵巢,主要在减数分裂时期的卵母细胞中表达,在敲除型精巢中表达量很少,表明igf2bp3基因介导卵巢发育。酵母双杂交筛选出与gsdf结合的TGF-β受体amhr II,通过gsdf与amhr II的原位杂交发现,amhr II在敲除型精巢的表达相比于野生型性腺没有表达的差异,所以我们猜测HNI品系中巨大精巢的出现不是通过gsdf-amhr II雄性通路调控的。又通过gsdf与dmrt1的原位杂交发现dmrt1在敲除型巨大精巢与野生型精巢的表达没有差异,暗示可能gsdf-dmrt1雄性通路不是HNI品系中巨大精巢的出现的主要因素。本实验通过对两种品系青鳉的对比研究发现,青鳉存在非gsdf雄性通路,我们目前发现了igf2bp3因子,主要表达在卵巢减数分裂的生殖细胞中,它在卵母细胞发育中起着重要作用,卵母细胞发育在低等脊椎动物中是保守的。Igf2bp3的功能分析将为进一步了解硬骨鱼中卵子发生与精子发生的机制提供理论依据,这些机制可能为研究脊椎动物生殖发育中的分子机制和作用提供了一个良好的参考。