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狂犬病为一种急性的侵害神经系统的人畜共患疾病，可以使所有的温血动物感染，包括人在内。一旦感染出现脑脊髓炎症状后，死亡率100％。狂犬病在发展中国家仍是一个重要的公共卫生问题。由于市场上还没有针对狂犬病病毒P和M蛋白的抗体出售，所以制备针对RV的P和M蛋白的抗体，对于进一步研究P和M蛋白的功能十分必要。
本研究使用PCR的方法从实验室保存的重组质粒pMD-NSM（包含有全长P和M基因）中扩增出ERA株RV的P和M基因，分别克隆到pMD18-T载体中。再将P和M基因分别定向亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)中，把获得的阳性重组表达质粒pET-P和pET-M分别转化原核表达宿主菌BL21(DE3)，IPTG诱导表达，SDS-PAGE电泳分析发现，pET-P和pET-M分别表达出大小50KD和39KD左右的融合蛋白。SDS-PAGE电泳分析目的蛋白的表达形式，发现P重组蛋白的表达主要以可溶的形式存在，而M重组蛋白则是以包涵体的形式表达。用Ni-NTA亲和层析在非变性条件下纯化P蛋白，获得较高纯度的蛋白。同时用含不同浓度尿素的包涵体洗涤液初步洗涤纯化M蛋白。Westernblot检测结果表明表达的融合蛋白P和M均可被RV阳性血清识别，证明其具有良好的免疫原性。纯化后的蛋白用于免疫小鼠制备多克隆抗体，Westernblot和间接免疫荧光验证制备抗体的特异性。Westernblot结果表明制备的抗RV的P和M蛋白的多克隆抗体可以识别RV中相应的蛋白，这证实所制备的多克隆抗体有较好的特异性。间接免疫荧光实验也证实制备的抗体可以识别感染flury株RV的NA细胞中相应的P和M蛋白。本研究制备的多克隆抗体，将为进一步研究P和M蛋白在病毒感染中的功能作用奠定良好基础。