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猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征的传染病。该病自发现以来给我国养猪业造成了巨大的经济损失。近几年我国大部分地区夏秋季出现的高热病,我国农业部2007年确定引起高热病的主要病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株。自2006年6月至2008年10月,从河南省各个地区规模猪场及散养户中随机采集方式收集猪血样和病料,接种Marc-145细胞,采用RT-PCR方法扩增PRRSV的ORF5和Nsp2基因,共获得PRRSV的16个ORF5基因和4个Nsp2基因的部分片段,将扩增得到的cDNA片段克隆于PTG19-T载体中,进行序列测定和分析,所获得的16个ORF5基因序列长度均为603bp,均未发现有缺失;而所获得的4株分离株Nsp2的序列均存在缺失,Hn-4、Hn-8和Hn-14缺失的位置同国内报道的PRRSV变异株相同,即与本试验分析所用的HUB1、HUB2、HEB、Jx0612、JXA1和Jxwn06相同,均存在89个缺失,其中3个缺失位点与另外86个缺失位点不连续,而86个缺失位点却是连续的;HB-2有13个氨基酸缺失;而本次分离的毒株Hn-2只有3个核苷酸缺失,其他序列16244B、BJ-4、CH-1a、CC-1、RespRRS MLV和VR-2332的序列均不存在缺失。序列比较结果表明所获得ORF5基因序列核苷酸的同源性为85.6%～99.8%,与VR2332株的同源性为88.6%～99.0%,与LV株的同源性为62.2%～64.8%,表明所获得序列的流行毒株均属美洲型。获得Nsp2基因序列核苷酸的同源性性为80.0%～99.7%,与VR2332株的同源性为80.6%～82.2%,与国内所报道的高热病变异株的同源性为96.0%～99.3%,参考国内外已经发表的ORF5基因和Nsp2基因序列,采用分子生物学软件绘制了PRRSV的遗传演化关系图。16株分离株中只有Hn-3与疫苗株同源性高,而其它分离株却与国内分离的变异株JXA1、Jx0612、Jxwn06、HUN、HUB1和HUB2等的同源性很高。遗传演化关系图显示,获得的流行毒株和国内目前使用的疫苗株属于不同分支,遗传距离较远;和国内分离的变异株属于同一分支,有较近的亲缘关系,由此说明所分离的毒株可能是野毒株,不是疫苗株演化而来。有资料报道,新出现的以Nsp2基因部份缺失为特征的PRRSV对猪是高致病性的,为了弄清我们所分离毒株的致病性,选取Nsp2基因连续有3个缺失和有89个连续缺失的两个毒株Hn-2和Hn-4,人工感染仔猪,以Marc-145细胞液滴鼻感染仔猪作为健康对照,结果猪只均未出现死亡,感染均耐过。在不同时间无菌采血,分离血清,检测病毒及抗PRRSV N蛋白抗体水平和中和抗体水平,比较不同时期病毒和抗体水平的关系。结果表明,猪感染Hn-2和Hn-4毒株后在第7～14d均能检测到病毒,抗PRRSV N蛋白抗体感染后7d既能检测到,并一直维持较高水平,分别于感染后第41d和第50d检测到较低水平的中和抗体,随后中和抗体效价逐渐升高。