顺铂对宫颈癌细胞IGF-1R表达及增殖凋亡的影响

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目的:本研究通过顺铂干预宫颈癌Hela、Caski细胞株影响癌细胞增殖、凋亡及IGF-1R的表达水平,探讨顺铂影响宫颈癌细胞增殖及凋亡与IGF-1R的关系。方法:(1)体外培养人宫颈癌细胞株Hela细胞与Caski细胞;(2)MTT比色法检测不同浓度顺铂干预对宫颈癌细胞生长增殖的影响;(3)AO荧光染色检测不同浓度顺铂对宫颈癌细胞凋亡的影响;(4)免疫细胞化学检测不同浓度顺铂干预前后IGF-1R蛋白表达差异。结果:(1)MTT结果显示,在相同作用时间,Hela细胞与Caski细胞均随着化学药物浓度增大,细胞存活率逐渐下降,以4gg/ml、2μg/ml干预的各组细胞生长抑制最明显,均有统计学差异(P<0.01)。0.25μg/ml、0.125μg/ml及DMSO干预组细胞存活率两组间比较均无显著性差异(P>0.05),其细胞存活率明显高于其它各浓度组,差异有统计学意义(P<0.01)。1μg/ml、0.5μg/ml干预组细胞存活率无显著性差异(P>0.05)。在相同作用时间和相同剂量药物干预时,Caski组细胞的存活率略高于Hela组,但均无统计学差异(P>0.05)。在不同作用时间,两组细胞的DMSO组间均无显著性差异(P>0.05)。(2)AO荧光染色检测结果显示:hela、caski细胞经不同浓度DDP干预不同时间后的凋亡率亦不同,随着DDP剂量的增大、作用时间的延长,凋亡率亦明显增加,均有显著性差异(P<0.01)。在相同作用时间和相同剂量DDP干预时,Caski组细胞的凋亡率低于Hela组,均有统计学差异(P<0.05);在相同时间段比较,各时间段DMSO组的凋亡率无明显差异(P>0.05),两组细胞均于DDP浓度为0.25μg/ml后凋亡率明显增加(P<0.01)。(3)免疫细胞化学结果显示:IGF-1R蛋白在宫颈癌细胞株中高表达,在相同作用时间和相同剂量DDP干预时,caski细胞中的IGF-1R蛋白表达高于hela细胞,且均随着DDP浓度的增大、作用时间的延长,IGF-1R蛋白表达下降。在不同作用时间里,对照组PBS中IGF-1R蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),PBS组IGF-1R蛋白表达明显高于各组,差异有统计学意义(P<0.01),4μg/ml组IGF-1R蛋白表达明显低于各组,差异有统计学意义(P<0.01)。IGF-1R蛋白表达呈药物剂量依赖性下降,且各组间差异有统计学意义(P<0.01)。(4)双变量相关分析显示:IGF-1R蛋白表达水平与两组细胞的存活率呈正相关,P<0.01;与两组细胞的凋亡率呈负相关,P<0.01。结论:(1)IGF-1R高表达可能与宫颈癌发病有关,且IGF-1R在鳞癌细胞中的表达可能高于腺癌细胞。(2)顺铂可能是通过降低IGF-1R的表达来抑制宫颈癌细胞增殖、诱导凋亡。
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