人甲状旁腺激素(Trx-hPTH)是人体内由甲状旁腺主细胞分泌的多肽类激素,具有调节钙磷平衡功能,由84个氨基酸组成,经研究发现它能够促进人体对Ca2+的重吸收和磷酸盐的排出,刺激软骨细胞和成骨细胞分裂,增加骨基质密度,是治疗骨质疏松症的蛋白药物。本文以大肠杆菌E. coli BL21(DE3)为宿主,pET32a为表达载体,进行人甲状旁腺激素的发酵表达,首先研究了在不同培养基中菌体生长和融合蛋白表达的特性,筛选出TB培养基作为发酵培养基,研究重组菌在摇瓶培养时的最佳发酵条件,选用LB培养基作为活化培养基,TB培养基作为发酵培养基,研究在不同培养条件下菌体浓度和目的蛋白表达量,优化发酵结果如下：用自来水配制培养基,pH为7,37℃下培养,活化培养5.5h后加诱导剂IPTG, IPTG终浓度为0.2mM,诱导3.5h时,Trx-hPTH的胞内蛋白量达到最大。同时在实验中发现不添加外源诱导剂时,目标蛋白也有表达,这与培养基中的酵母粉有关,本文对酵母粉的诱导规律进行研究,比较了三个品牌的酵母粉的诱导效果,三个品牌分别是BBI, Sangon, OXIOD,研究发现用不同的水源(蒸馏水和自来水)配制培养基,目标蛋白表达结果有差异,Sangon酵母粉在两种水源的培养基中都能表达,BBI在两种培养基中均不能表达,OXIOD酵母粉在蒸馏水的培养基中无明显表达,在自来水配制的培养基中表达显著。OXIOD酵母粉在浓度大于24g/1时能诱导大量目标蛋白表达。对OXIOD酵母粉进行分离,先后使用透析袋,不同的色谱柱进行分离。