为研究猞猁细胞体外培养体系及生物学特性,深入开展猞猁基因组学及濒危野生动物保护工程,本研究获取猞猁心脏、躯体、睾丸三种组织,采用组织块培养法,用α-MEM培养液进行原代、传代培养,进行常规冷冻和复苏,建立了猞猁三种组织成纤维细胞的体外培养体系,并对培养的细胞进行形态学观察、生长曲线测定、微生物污染检测、染色体核型分析、荧光蛋白质粒转染表达等特性研究。结果显示：猞猁心脏、躯体及睾丸来源的组织块分别在培养5～6d、8～9d、11～12d时开始有成纤维样细胞从中长出。在进行传代时,这3种组织来源的细胞群体倍增时间均为40h,通常在4-5d可铺满瓶底；对比细胞冻存前后存活率,细胞复苏后活率较冻存前有所下降,但均有较高的存活率,都达到90%以上；三种组织细胞生长曲线均呈“S”型,符合体外培养细胞的生长规律,均经历了潜伏期、指数生长期和停滞期；细菌、真菌、病毒、支原体等微生物污染检测呈阴性；对猞猁50个中期分裂细胞进行染色体数目统计,染色体数目为2n=38,为19对,其中18对为常染色体,1对为性染色体。有约88%(44/50)的细胞染色体具有正常二倍体特性,说明试验所培养的细胞遗传特性相对稳定。脂质体介导的红色荧光蛋白质粒转染猞猁三种组织成纤维细胞,用8μl脂质体介导4μg质粒转染24h即可获得较满意的转染效率。转染率分别为心脏来源细胞58%、躯体来源细胞51%、睾丸来源细胞46%,表明本研究体外培养的猞猁细胞能有效地转染表达外源基因。结论,已成功建立猞猁心脏、躯体、睾丸三种组织成纤维细胞的体外培养体系,在体外能稳定培养和传代,使猞猁的遗传资源在细胞水平上长期保存下来,为今后猞猁不同组织细胞的深入研究提供试验材料,也将为充分利用和科学开发珍贵野生动物遗传资源、开展濒危野生动物保护工程提供科学数据。