高产漆酶细菌的筛选及芽孢漆酶对染料脱色的研究

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利用含铜的富集培养基从土壤中筛选出漆酶活性较高的菌株,结合形态学、生理生化特性及16S rDNA序列分析鉴定该菌株属于芽孢杆菌属,命名为Bacillus sp.CLb。菌株CLb培养5d的芽孢漆酶活性达到46.1U/mg干重,该菌株最适生长温度为37℃,最适生长pH值为7.0,菌株能在含1mol/L Cu2+的培养基中生长,具有很强的耐铜性。以2,2-连氮-二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)和丁香醛连氮为底物,菌株CLb芽孢漆酶对其氧化的最适pH值分别为3.0和7.0。以丁香醛连氮为底物时的最适温度为70℃。菌株CLb芽孢漆酶的稳定性较好,在70℃保温10h或pH9.0条件下放置10d依旧有酶活。Mn2+、Hg2+、Ag+和Al3+可抑制菌株CLb芽孢漆酶的活性;Na+、Cu2+、Mg2+、Ba+和Co2+能促进菌株CLb芽孢漆酶的活性。在介体乙酰丁香酮存在的脱色体系中,菌株CLb芽孢漆酶在4h内对活性黑,在2h内对靛红的脱色率均达到93%,在6h内对活性亮蓝和结晶紫脱色率分别为79%和92.5%。菌株CLb的芽孢漆酶在无介体参与下只能使活性亮蓝和结晶紫脱色。在介体乙酰丁香酮(ACE)的作用下,芽孢漆酶对RBBR、活性黑、靛红和结晶紫的脱色率均超过70%。芽孢漆酶在pH7.0的条件下对活性黑和靛红的脱色效果要比pH9.0条件下的好。在pH9.0,芽孢漆酶-介体体系对模拟染料废水的脱色时,最适酶浓度和介体浓度分别为3 mg/mL和0.5mmol/L,6h后脱色率达到80%以上。
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