大蒜素对胆管癌细胞上皮间质化的影响研究

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目的:旨在探讨大蒜素对胆管癌细胞上皮间质化的影响及其作用机制,为大蒜素应用于胆管癌的治疗提供理论依据。方法:采用MTT法检测大蒜素对人胆管癌RBE细胞的增殖抑制作用,将其作用24h后IC50数值作为大蒜素给药浓度,将其分为空白对照组、大蒜素组(IC50)、TGF-b1组(10ng/mL)和大蒜素+TGF-b1组(IC50+10ng/mL);采用划痕实验和Transwell小室试验分别检测大蒜素作用于RBE细胞24h后迁移及侵袭能力;采用Western blot分别检测各组EMT相关蛋白分子(E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin、Snail)及NF-kB信号通路相关蛋白表达水平。结果:大蒜素以剂量依赖性方式抑制RBE细胞增殖,24h的IC50约为130.7μmol/L;划痕实验显示大蒜素作用24h后,与空白对照组(28.19%±0.66%)及TGF-b1组(49.22%±0.27%)迁移率相比,大蒜素组(9.25%±0.36%)及大蒜素+TGF-b1组(13.91%±0.75%)均下降(P<0.05);Transwell小室实验显示大蒜素作用24h后,与空白对照组(33.48%±0.04%)及TGF-b1组(40.21%±0.12%)侵袭率相比,大蒜素组(6.59%±0.06%)及大蒜素+TGF-b1组(9.40%±0.05%)亦均下降(P<0.05);Western实验显示,与空白对照组相比,大蒜组中E-Cadherin表达增加,而Snail、N-Cadherin、Vimentin、NF-kB及p-NF-kB表达减少(P<0.05);与TGF-b1组相比,大蒜素+TGF-b1组的Snail、N-Cadherin、Vimentin、NF-kB及p-NF-kB表达下降,且E-Cadherin表达升高(P<0.05)。结论:大蒜素可抑制人胆管癌RBE细胞的增殖。大蒜素能够通过阻断NF-kB信号通路,进而下调Snail、N-Cadherin、Vimentin和上调E-Cadherin蛋白表达抑制人胆管癌细胞上皮间质化的发生。大蒜素亦能抑制TGF-b1诱导的人胆管癌细胞发生上皮间质化,这对于抗胆管癌药物的研发具有一定的潜在价值。
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