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第一部分罗格列酮抑制鼠肝脏缺血再灌注中TLR4基因表达的时序性变化及意义目的:通过研究过氧化物酶增殖物激活受体γ(peroxisome proliferater-activated receptorγ, PPARγ)激动剂罗格列酮抑制TLR4基因在小鼠肝脏缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,IRI)中的动态时序性表达,探讨罗格列酮对TLR4基因表达的抑制与肝功能损伤间的关系。方法:以BALB/c小鼠复制肝脏部分IRI模型,动物随机分为罗格列酮+IRI组、对照组(二甲基亚砜+IRI组)及假手术组。在缺血再灌注的0、2、4及6小时采集标本。采用实时荧光定量PCR方法观测在小鼠肝脏部分缺血再灌注损伤模型中罗格列酮抑制TLR4基因的动态时序性表达变化,同时动态监测门静脉血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)水平。结果:鼠肝脏左中叶缺血1 h后,不同的再灌注时间0h,2h,4h,6h中罗格列酮+IRI组缺血肝叶TLR4基因表达、血清TNF-α及ALT水平较二甲基亚砜+IRI组中均明显下调(P<0.05)。再灌注4小时二甲基亚砜+IRI组缺血肝叶的TLR4基因表达最高,与同组中不同的再灌注时间0h,2h, 6h差异显著(P<0.05)。再灌注4小时罗格列酮+IRI组缺血肝叶TLR4基因表达最低,与同组中不同的再灌注时间0h,2h, 6h差异显著(P<0.05)。结论:小鼠肝脏部分缺血再灌注模型中罗格列酮抑制TLR4基因表达并减轻肝脏损伤。罗格列酮影响最为显著的时间点是复灌后4小时。第二部分PPARγ抑制鼠肝脏部分缺血再灌注中TLR4表达及其机制目的:为深入探讨肝脏缺血再灌注损伤机制,寻找肝缺血再灌注损伤治疗的新靶点,我们观察在小鼠肝脏部分IRI中PPARγ及TLR4表达及门静脉血清TNF-α、白细胞介素10(interleukin-10, IL-10)和ALT水平的变化,研究在此过程中罗格列酮激活的PPARγ对TLR4表达改变及与IL-10相互作用机制及其生物学效应。方法:以BALB/c小鼠制作肝脏部分IRI模型。小鼠随机分为五组:罗格列酮+IRI组、罗格列酮+BADGE+IRI组、BADGE+IRI组、对照组(二甲基亚砜+IRI组)、假手术组。复灌4小时处死动物取材。采用实时荧光定量PCR方法观测PPARγ、TLR4基因在各组小鼠肝脏部分缺血再灌注损伤过程中的表达变化,同时检测血浆TNF-α、IL-10及ALT水平,行肝脏的病理切片(HE染色)检查。结果:结果显示罗格列酮+IRI组PPARγ表达较罗格列酮+BADGE+IRI组、BADGE+IRI组及对照组显著增高(P<0.05)。罗格列酮+IRI组的TLR4表达较罗格列酮+BADGE+IRI组、BADGE+IRI组及对照组显著减弱(P<0.05)。罗格列酮+IRI组血清IL-10水平较罗格列酮+BADGE+IRI组、BADGE+IRI组及对照组显著增高(P<0.05)。罗格列酮+IRI组血清TNF–α及ALT水平较罗格列酮+BADGE+IRI组、BADGE+IRI组及对照组显著降低(P<0.05),均高于假手术组(P<0.05)。病理切片显示罗格列酮+IRI组中肝细胞轻中度水肿,罗格列酮+BADGE+IRI组、BADGE+IRI组及对照组中肝细胞重度水肿,小叶结构破坏明显。结论:鼠肝脏IRI中罗格列酮激活PPAR-γ并上调IL-10水平,抑制TLR4表达及其诱发的的固有免疫应答效应,减轻肝脏IRI。PPARγ抑制剂BADGE消除罗格列酮的上述作用。PPARγ可能通过上调IL-10抑制TLR4表达。