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近年来，随着抗生素的大量、持续且不恰当应用，细菌对抗生素的耐药性问题日趋严重。金黄色葡萄球菌作为人医及兽医临床的常见病原菌之一，其耐药性已严重影响了临床抗感染的治疗效果，因而对金黄色葡萄球菌的耐药性进行快速有效检测，控制耐药性的进一步传播迫在眉睫。基因芯片作为一种新技术用于抗菌药物耐药性检测，具有高通量、迅速、高效、特异等特点，能够满足临床对抗菌药物耐药性检测的要求。本试验拟通过临床金黄色葡萄球菌的采集，耐药性检测及其主要耐药基因的克隆与同源性分析为制备耐药性检测芯片的阳性样本奠定了基础。本论文共包括三部分研究内容：本试验采集吉林省部分地区各大猪场、牛场、鸡场发病畜禽的脓汁或败血症的血液、肝、肾、脾等标本病料，根据病原细菌检验技术进行分离、鉴定，获得14株金黄色葡萄球菌，作为进一步研究用的供试菌株。应用平皿二倍稀释法测定临床分离的14株金黄色葡萄球菌对青霉素G、红霉素、林可霉素、盐酸环丙沙星及四环素的最低抑菌浓度(MIC)，筛选出对青霉素G高度耐药的金黄色葡萄球菌1株、对红霉素和林可霉素高度耐药的金黄色葡萄球菌7株，对盐酸环丙沙星高度耐药的金黄色葡萄球菌4株及对强力霉素高度耐药的金黄色葡萄球菌6株，其中有6株金黄色葡萄球菌为多重耐药菌，同时对两种或两种以上抗菌药物耐药。根据国内外最新文献报道，筛选出对β-内酰胺类抗生素耐药的mecA基因及辅助因子femA；对大环内酯类及林可霉素类抗生素耐药的ermA、ermC、msrA基因，对喹诺酮类抗菌药物耐药的norA、grlA和gyrA基因及对四环素类抗生素耐药的tetM基因作为拟选的主要耐药基因，分别设计PCR扩增的特异性引物，进行克隆。应用DNAsis软件对其序列进行同源性分析的结果表明，上述基因与GenBank中发表的该基因序列同源性均为99％以上。金黄色葡萄球菌H34株mecA基因、H34株ermA基因，O41株ermC基因、H34株和K7株msrA基因、H34株gyrA，grlA基因、S19株norA基因及H34株tetM基因均可作为金黄色葡萄球菌耐药基因检测芯片的阳性样本。本试验另发现：金黄色葡萄球菌H34株grlA基因96位及99位均由Leu—Ser，位于金黄色葡萄球菌喹诺酮耐药决定区(QRDR)内部，也可能与金黄色葡萄球菌对喹诺酮类抗菌药物耐药有关，上述试验结果至今未见相关文献报道。