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目的:了解维吾尔族妇女宫颈癌及癌前病变组织DAPK启动子甲基化水平;探讨DAPK基因与宫颈病变程度之间的相关性。
方法:(1)运用甲基化特异性PCR(MSP)法检测维吾尔族妇女宫颈慢性炎症组织30例、CINⅠ30例、CINⅡ/Ⅲ30例、宫颈鳞癌组织30例中DAPK启动子甲基化水平。(2)运用免疫组化SP法检测维吾尔族妇女宫颈慢性炎症组织30例、CINⅠ30例、CINⅡ/Ⅲ30例、宫颈鳞癌组织30例组织中DAPK蛋白表达水平(3)运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测维吾尔族妇女宫颈慢性炎症组织10例、CINⅠ10例、CINⅡ/Ⅲ15例、宫颈鳞癌组织20例中mRNA的表达水平。(4)运用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)检测维吾尔族妇女宫颈慢性炎症组织30例、CINⅠ30例、CINⅡ/Ⅲ30例、宫颈鳞癌组织30例中HPV感染率。
结果:(1)维吾尔族妇女DAPK基因启动子甲基化检出率在宫颈慢性炎症组织、CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ、宫颈鳞癌组织中分别为3.33%、10%、36.7%、63.3%,SCC组的甲基化率明显增高,与前三组有显著性(P<0.05);(2)DAPK蛋白表达率在宫颈慢性炎症组织、CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ、宫颈鳞癌组织中分别为93.3%、83.3%、60.0%、33.3%,SCC组阳性表达率明显减少,与前三组有显著性(P<0.05);(3)四组mRNA的表达率分别为90%、90.0%、46.7%、10.0%,SCC组阳性表达率明显减少,各组比较之间有统计学意义(P<0.05)。(4)宫颈癌组织中DAPK基因甲基化水平与DAPK蛋白水平和mRNA水平的表达均成负相关(P<0.05),与宫颈病变程度成正相关(P<0.05)。(5)四组HPV阳性率分别为43.3%、56.7%、76.7%、93.3%,HPV阳性率和宫颈病变程度成正相关(P<0.05)。
结论:(1)新疆维族妇女宫颈病变组织中DAPK基因启动子甲基化与宫颈病变程度呈负相关,DAPK基因甲基化可能参与了宫颈癌的发生,检测DAPK基因甲基化水平可为宫颈癌发展的早期预警提供依据。(2)DAPK基因启动子甲基化可导致基因的失活,使其在mRNA水平及蛋白水平表达降低及消失,两者均与DAPK基因甲基化水平均成负相关关系。(3)HPV感染与宫颈病变的严重程度呈正相关,HPV感染在宫颈病变的发展过程中起到了极大的促进作用,是宫颈癌致病因素之一。