【摘 要】
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目的:探讨活化诱导的胞苷脱氨酶（AID）在正常前列腺、良性增生前列腺和前列腺癌人体组织样本中的表达情况,以及前列腺癌细胞C4-2中的表达情况。AID对前列腺癌细胞C4-2的侵袭、迁移、增殖以及凋亡等生物学行为的影响和机制。方法:应用免疫组织化学染色法和Western-blot方法检测正常前列腺、良性增生前列腺和前列腺癌组织样本及前列腺癌细胞C4-2中AID的表达,应用免疫荧光技术检测E钙粘蛋白（E
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目的:探讨活化诱导的胞苷脱氨酶（AID）在正常前列腺、良性增生前列腺和前列腺癌人体组织样本中的表达情况,以及前列腺癌细胞C4-2中的表达情况。AID对前列腺癌细胞C4-2的侵袭、迁移、增殖以及凋亡等生物学行为的影响和机制。方法:应用免疫组织化学染色法和Western-blot方法检测正常前列腺、良性增生前列腺和前列腺癌组织样本及前列腺癌细胞C4-2中AID的表达,应用免疫荧光技术检测E钙粘蛋白（E-cadherin）的表达。运用基因干扰技术抑制前列腺癌细胞C4-2中AID表达,筛选抑制效果最好的单克隆细胞株;Western-blot方法检测shRNA抑制AID表达后的C4-2细胞与空白对照组（C4-2组）、阴性对照组（NC组,转染空载体序列的C4-2细胞）中AID表达量;甲基转移酶抑制剂（5-AZA-d C）刺激单克隆细胞组（Monoclonal6组,抑制AID表达效果最好的单克隆细胞株）后Wnt/β-catenin信号通路和EMT相关蛋白分子表达。应用平板克隆方法检测C4-2细胞Monoclonal6组细胞增殖能力,流式细胞术检测C4-2细胞Monoclonal6组细胞凋亡率,应用Transwell小室试验方法检测Monoclonal6组细胞侵袭和迁移能力。结果:前列腺癌人体组织样本和前列腺癌细胞C4-2中AID分子高表达,正常前列腺和良性增生前列腺人体组织样本中AID表达量极低,差异具有统计学意义（*P<0.05）,而E-cadherin在上述三种人体组织样本中表达量与AID表达情况相反;抑制AID表达后Monoclonal6组中AID的表达量与C4-2组或NC组对比明显降低（*P<0.05）,且Wnt/β-catenin通路中的GPR177、β-catenin以及EMT中的N-钙粘蛋白（N-cadherin）和波形蛋白（Vimentin）表达量均明显下降（*P<0.05）,MMP14和SDF1也因抑制AID导致其表达量显著降低（*P<0.05）;抑制AID表达后的Monoclonal6组侵袭和迁移能力与C4-2组或NC组对比均显著降低（*P<0.05）,增殖能力也显著降低（*P<0.05）,但凋亡率明显上升（*P<0.05）;5-AZA-d C刺激Monoclonal6细胞后GPR177、β-catenin、N-cadherin表达量与NC组对比恢复到抑制前水平。结论:AID在前列腺癌人体组织和C4-2细胞中高表达,AID在前列腺癌细胞C4-2中异常高表达可提高其增殖能力,同时也抑制其细胞凋亡,AID可能通过脱甲基作用介导Wnt/β-catenin信号通路调控EMT促进前列腺癌细胞侵袭和迁移。
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