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目的:三基序蛋白11(TRIM11)属于E3泛素连接酶家族成员之一,在多种人类恶性肿瘤其表达水平升高。而TRIM11在乳腺癌发生发展过程中的具体功能尚不明确。本研究的目的旨在研究TRIM11在乳腺癌细胞中的生物学功能及其潜在的可能信号通路。方法:(1)应用RT-PCR实验技术,检测35对乳腺癌组织和癌旁正常组织中TRIM11、GLUT1、HKⅡ的m RNA表达水平。(2)应用RNA干扰实验技术,在乳腺癌细胞T47D、ZR7530和BT474中构建TRIM11稳定低表达细胞株。(3)在乳腺癌细胞MDA-MB-231用于转染TRIM11过表达慢病毒,构建TRIM11稳定过表达细胞株。(4)我们通过调控TRIM11在乳腺癌细胞中的表达,研究TRIM11对于乳腺癌细胞增殖,葡萄糖代谢等生物学行为的影响,并且探讨潜在的分子机制。(5)应用AKT抑制剂MK-2206,研究分析TRIM11和AKT信号通路在乳腺癌细胞中是否存在潜在联系。结果:1.TRIM11、GLUT1、HK-Ⅱ在乳腺癌组织中的表达水平显著升高。通过RT-PCR实验,检测35对乳腺癌组织和癌旁正常组织中TRIM11、GLUT1、HK-Ⅱ的m RNA表达水平,我们发现与癌旁组织相比,乳腺癌组织中TRIM11、GLUT1、HK-Ⅱ的表达升高。TRIM11是否通过影响GLUT1、HK-Ⅱ的表达水平从而影响乳腺癌的糖酵解、细胞增殖值得我们进一步探讨。2.TRIM11低表达显著抑制乳腺癌细胞的增殖能力。乳腺癌细胞T47D、ZR7530和BT474中转染TRIM11干扰慢病毒后24小时,显著抑制乳腺癌细胞增殖能力。转染TRIM11干扰慢病毒48和72小时以后,这种TRIM11低表达抑制乳腺癌细胞增殖能力作用更加明显。3.TRIM11低表达显著抑制乳腺癌细胞葡萄糖摄取能力和乳酸生成水平。与空白对照细胞、和转染空载慢病毒相比,转染TRIM11干扰慢病毒组乳腺癌细胞中对于葡萄糖类似物2-NBDG的摄取水平明显降低。同时,转染TRIM11干扰慢病毒组乳腺癌细胞中乳酸生成水平明显降低。在机制研究中,用Western Blot技术检测乳腺癌细胞T47D、ZR7530、BT474转染TRIM11干扰慢病毒后对于p-AKT、AKT、HKⅡ、GLUT1蛋白水平的影响。转染TRIM11干扰慢病毒后,显著抑制乳腺癌细胞T47D、ZR7530、BT474中p-AKT的蛋白表达水平。与此同时,HKⅡ、GLUT1蛋白水平也显著下调。4.TRIM11在乳腺癌细胞中的功能被AKT抑制剂抑制。TRIM11过表达促进乳腺癌细胞增殖能力,但是当转染TRIM11过表达慢病毒同时给予AKT通路抑制剂MK-2206处理后,这种作用被抑制。TRIM11过表达显著促进乳腺癌细胞MDA-MB-231的葡萄糖转运能力和乳酸生成水平。但是,当TRIM11过表达乳腺癌细胞同时给予AKT抑制剂MK2206处理后,乳腺癌细胞MDA-MB-231的葡萄糖转运能力和乳酸生成水平下降。Western Blot技术检测乳腺癌细胞MDA-MB-231转染TRIM11过表达慢病毒后对于p-AKT、HKⅡ、GLUT1蛋白水平的影响。我们发现,转染TRIM11过表达慢病毒后,显著促进乳腺癌细胞MDA-MB-231中p-AKT、HKⅡ、GLUT1蛋白表达水平。而同时给予AKT抑制剂MK2206处理后,p-AKT、HKⅡ、GLUT1的表达水平下调。5.TRIM11低表达抑制乳腺肿瘤体内增殖能力,促进乳腺癌细胞凋亡,通过调节AKT/GLUT1/HKⅡ的表达起作用。12只裸鼠随机分为2组,一组为空载组,接种空载ZR7530细胞100μl(5×10~6个);另一组为TRIM11干扰组,接种TRIM11基因稳定干扰的ZR7530细胞100μl(5×10~6个)。我们发现与对照组相比,TRIM11干扰组肿瘤的重量、体积显著降低。随后进行的细胞凋亡实验,发现TRIM11干扰组乳腺肿瘤的凋亡率明显高于对照组。随后利用Western Blot技术检测转染TRIM11干扰慢病毒后对于p-AKT、AKT、HKⅡ、GLUT1蛋白水平的影响。我们发现TRIM11低表达,显著抑制p-AKT、GLUT1、HKⅡ的蛋白表达水平。进一步证实了,TRIM11在体内也是通过调节AKT/GLUT1/HKⅡ的表达从而影响乳腺肿瘤的增殖能力。结论:1.与癌旁正常组织相比,TRIM11在乳腺癌组织中表达显著升高。2.TRIM11在乳腺癌细胞中是调节细胞增殖的重要基因并且在葡萄糖代谢过程中发挥重要作用。3.TRIM11通过AKT/GLUT1信号通路影响乳腺癌细胞增殖和葡萄糖代谢。总而言之,我们通过此研究阐释了TRIM11在乳腺癌发生发展中的功能及其相关分子机制。同时,TRIM11也有可能成为抗肿瘤治疗的潜在靶点或观察肿瘤患者预后和转移的生物标志物。