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食管癌是一种常见的恶性肿瘤,在全球的恶性肿瘤中,其发病率和死亡率分别排在第8位和第6位。我国是食管癌的高发区。上皮来源的食管癌分两个亚型:食管鳞状细胞癌(ESCC)和食管腺癌(EAC)。我国的食管癌以鳞癌为主。一直以来手术切除都是最主要的治疗手段,但术后肿瘤的转移仍影响着患者的预后。因此,改善食管鳞癌患者的发病和死亡率的关键是控制肿瘤的转移。然而目前转移的分子机制仍不完全清楚。
已有研究表明,仅有19-24个核苷酸的小RNA(miRNAs)作为一类高度保守的非编码RNA,在多种恶性肿瘤的发生过程中起到重要作用。我们前期芯片结果证明实miR-25在食管癌中明显高表达。然而,其在食管鳞癌中所发挥的生物作用机制仍不明了。本研究的目的是揭示miR-25在食管癌中的表达模式及其在食管癌发生中发挥的作用。
在本研究当中,我们发现miR-25在60例食管鳞癌组织及5株食管鳞癌细胞系细胞中明显高表达,并且在食管癌组织中miR-25的DNA拷贝数明显增加。同时发现,miR-25的高表达与淋巴结的转移及肿瘤的TNM分期密切相关。我们同时检测了28例正常食管粘膜组织和24例食管粘膜不典型增生组织中miR-25的水平,发现miR-25的表达水平在正常食管粘膜、不典型增生及食管鳞癌组织中是依次增高的,而且之间的差异有统计学意义。在体外实验中发现,通过转染miR-25前体分子使细胞中的miR-25过度表达,能够促进细胞的侵袭和转移;反之,抑制细胞中miR-25的表达,能够抑制细胞侵袭和转移的能力。然而调整miR-25的表达量,对食管鳞癌细胞的增殖、凋亡及细胞周期无明显影响。我们通过双荧光素酶报告基因实验证明CDH1是miR-25的靶基因。众所周知,CDH1是一种抑制肿瘤转移的重要分子,并且其在食管鳞癌的发生过程中频繁的低表达。在体外实验中发现,miR-25表达增高,CDH1蛋白表达降低;反之,miR-25表达降低,CDH1蛋白表达增高。而且miR-25的表达量与CDH1蛋白表达量呈明显负相关。当在细胞内过表达CDH1,能够削弱细胞由于miR-25的过表达而增强的侵袭和迁移能力。
综上所述,我们发现miR-25在食管鳞癌组织中表达增高。miR-25的高表达水平与食管鳞癌的发生有关。进一步实验证明,miR-25通过抑制CDH1蛋白的表达促进细胞的侵袭和转移。