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目的: 乙型肝炎病毒(HBV)是一种嗜肝病毒属、双股环状DNA,是导致乙型病毒性肝炎的病原体。乙型病毒性肝炎作为一种传染性极强的疾病,在中国乃至全球仍旧是一个严重的全球性公共卫生问题。西藏阿里地区地理位置比较特殊,地处祖国西南边陲,地广人稀交通不太便利,是一个相对比较封闭的地理环境,同时该地区又和尼泊尔、印度等国家相邻,落后的生活条件和较差的就医环境使得西藏阿里地区的乙肝感染率明显高于其他省市地区,截止目前关于西藏阿里地区HBV的报道较少。当今分子生物学的飞速发展,HBV基因型的研究越来越多,乙型肝炎感染的急慢性化、流行病学特点、感染的病情转归和治疗及预后效果都与其感染的HBV基因型有着一定的关系。本次研究中我们通过采集西藏阿里地区世居藏族居民血液,检测HBV携带率和感染率等,结合病毒分离和生物信息学,分析HBV基因分型特点,为西藏阿里地区乙型肝炎防控提供科学依据。 方法: 对西藏自治区阿里地区2749名世居藏族居民(城镇居民929例,其中男性469例,女性460例;农牧民1820例,其中男性1078例,女性742例)。采集早晨空腹静脉血5mL,取适量血清用酶联免疫吸附试验方法(ELISA)分别检测HBV血清学标志物:乙型肝炎病毒表面抗原(HbsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(HbsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HbeAg)、乙型肝炎病毒e抗体(HbeAb)、乙型肝炎病的核心抗体(HbcAb)。利用统计学软件 SPSS19.0统计分析其 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb检测结果。随后将乙型肝炎标志物阳性的患者血清标本,进行HBV的DNA提取,分f1(1400bp) f2(1800bp)两个片段PCR特异性扩增HBV基因组。对特定乙型肝炎病毒 f1、f2片段进行回收、连接、转化、送菌液样本测定乙型肝炎病毒基因组序列。利用DNAMAN、DNAStar、MEGA、Figtree等生物信息学软件,进行全基因组序列拼接、比对并构建进化树,分析病毒基因的分型情况。 结果: 西藏阿里地区藏族人群的 HBV携带率高达20.33%,有免疫力的人群只有23.43%,感染率为26.12%,易感人群为50.45%。其中城镇居民和农牧民间HBV携带率、免疫力、感染率和易感率差异显著。城镇居民男性与女性的HBV携带率、感染率和易感率无统计学差异,但男性免疫水平显著低于女性。农牧民男性的HBV携带率、免疫力、感染率均显著高于女性,而易感率无统计学差异。测序共获得53株乙肝病毒全基因组序列,其中1株属于HBV D型的D3亚型占2%(1/53株)。其余52个毒株(98%)属于C型,1株属于C2亚型,其余均为HBV C/D重组型,其中66%(35/53株)属于CD1亚型,30%(16/53株)为CD2亚型。 结论: 1、西藏阿里地区藏族人群HBV的携带率20.33%,明显高于全国其它地区平均水平,而免疫率却低于全国其它地区水平,是乙型肝炎高度流行区域。 2、农牧民男性的HBV携带率、免疫率、感染率均显著高于女性,城镇居民HBV携带率、感染率和易感率不存在性别差异,但免疫水平差异较显著。 3、西藏阿里地区乙肝患者的HBV毒株以C型为主,占98%,并且存在少量D型,占2%。 4、西藏阿里地区HBV基因组存在广泛的C/D重组,包括CD1亚型35株(占69%)和CD2亚型16株(占31%)。