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目的:精神分裂症是复杂性状疾病的一种,它的遗传学研究方法比较复杂,既往的研究已经明确精神分裂症的遗传异质性为多基因遗传模式(包括双生子研究、家系研究、寄养子研究等)。本研究旨在通过病例-对照研究的方法比较分析中国汉族精神分裂症患者候选多巴胺D1受体基因多态性分布的差异,揭示多巴胺D1受体基因多态性以阐明其与中国汉族精神分裂症病因的关系,探索中国人精神分裂症的易患因素,探索该基因多态性在精神分裂症发病的遗传机制中的意义,从而为精神分裂症病因的研究和临床药物治疗提供一定的理论依据,并为该病的基因诊断和治疗提供初步的研究基础。为减少社会残障人员,降低社会压力有很大的意义。
方法:患者组:收集从2009年10月至2011年7月宝鸡市康复医院及西安交通大学医学院第一附属医院住院的精神分裂症患者,均为陕西籍汉族人,随机抽取样本,个体之间无血缘关系。对照组:为同期到西安交通大学第一附属医院体检中心参与体检的健康个体。
1.实验方法:使用CHELEX-100提取DNA;
2.根据预先选定的DRD1受体基因rs10063995位点,在NCBI获得位点前后300bp序列,设计引物,完成PCR扩增反应:
3.ABI3730测序仪对所得PCR扩增产物测序,将扩增结果酶切分型,并使用novosnp3.0.1软件,根据标准序列,找出SNP位点。
4.采用PCR-RFLP方法进行SNP分型,并统计数据。
5.使用SPSS16.0软件分析病例组和对照组SNP位点等位基因、基因型多态性有无差异。
结果:通过常规电泳方法检测基因型。
(1)患者组:共入组385例,男204例,女181例;平均年龄(30.5±12.2)岁。均为陕西籍汉族人,随机抽取样本,个体之间无血缘关系。对照组:为同期健康者共350名,男190名,女160名;平均年龄(31.5±12.2)岁,均为陕西地区汉族人。
(2)对病例组和对照组的基因型分别进行H-W平衡检验,病例组与对照组各基因型的观察值和期望值Hardy-weinberg平衡吻合度良好。提示选择的个体间无血缘关系。
(3)所选rs10063995基因SNP位点存在能被MspI内切酶所识别的G和T二态性:GT+TT基因型在患者组与对照组有显著性差异(P=0.008<0.05)。等位基因的频率患者组与对照组有显著性差异(P:0.004<0.05)。
(4)rs10063995各基因型的性别比较经x2检验可知,女性病例和对照组相比GG与GT+TT有显著性差异,P<0.05。男性性病例和对照组相比GG与GT+TT有显著性差异,P<0.05
结论:通过对385例精神分裂症患者和350例正常对照的DRDl基因rs10063995位点遗传多态性分析,所得数据基因型分布符合Hardy-weinberg平衡定律。本实验研究的结果表明:在中国汉族人群中DRDI.基因rs10063995位点的多态性可能与精神分裂症有关,在精神分裂症的遗传方面可能起一定的作用。rs10063995位点在精神分裂症患者和健康对照群体中,基因型频率和等位基因频率分布存在显著性差异,具有的统计学意义(P<0.05)。