论文部分内容阅读
本研究以白鹤芋花序为外植体,开展花序体胚直接诱导和快繁技术的研究,观察白鹤芋花序体细胞胚胎发生时期,筛选体细胞组培快繁的最佳培养方案。主要研究结果如下：1.白鹤芋花序体细胞胚发生(1)白鹤芋花序灭菌试验,采用3个不同发育时期的白鹤芋花序作为试验材料,用0.1%升汞溶液进行不同时间灭菌处理,筛选出不同发育时期花序最佳的灭菌时间。结果表明,盛花期的无菌花序获得率最高为64.44%,最佳灭菌时间为10min。(2)白鹤芋花序体细胞胚诱导试验,通过对6-BA、KT和NAA进行正交分析,筛选出最优激素组合6-BA 5.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,通过极差分析比较各激素间的影响,6-BA对体胚诱导影响最显著。采用二因素重复试验对不同发育时期及取材部位体胚诱导进行研究,盛花期形态学下端的体胚诱导率最高。采用单因素3水平完全随机试验,探究光周期对体细胞胚诱导的影响,试验结果表明,先黑暗培养15天后转到光暗比为12：12,为白鹤芋花序体胚诱导的最佳培养条件。2.白鹤芋快繁技术的研究(1)体细胞胚增殖培养研究中,采用单因素试验设计对最佳体胚增殖培养基进行筛选,确定6-BA 5 mg/L+ZT 0.3 mg/L+NAA 0.2 mg/L为最优白鹤芋花序体胚增殖培养基配方。采用单因素试验设计,开展蔗糖和葡萄糖培养试验,当蔗糖浓度为45g/L、葡萄糖浓度为30g/L时,体胚增殖达到最佳的效果。在继代频率影响研究中,继代周期控制在30-40d体胚的增殖效果最佳。(2)花序体胚萌发培养研究,综合比较激素、活性炭、蔗糖等因素,探讨出最佳白鹤芋花序体胚萌发的培养方案。确定IBA 0.1 mg/L+GA3 0.4 mg/L+蔗糖30g/L为最佳体胚萌发激素组合。添加6g/L活性炭,体胚萌发率可提高4.80%。(3)植株再生转化体系建立试验,通过对6-BA、IBA和GA3正交分析,筛选出最佳的植株再生转化培养基配方为6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+GA3 0.5 mg/L,植株转化率达88.560%,同时得到最优芽繁殖激素组合6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+GA3 0.3 mg/L,芽繁殖系数达到3.71。3.白鹤芋试管苗移栽及催花技术研究试管苗炼苗试验结果表明,炼苗6d后开盖2d,移栽于穴盘并覆膜14d,白鹤芋试管苗成活率达94.44%。不同浓度GA3白鹤芋催花试验,研究结果表明,当GA3浓度达到250mg/L时,白鹤芋催花效果最好,催花率达到66.67%。