【摘 要】
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目的:该研究拟应用HSV-1载体,在导入体外原代培养的人胚神经元的基础上,将其接种于实验动物的嗅神经末梢,研究该载体中介LacZ基因在动物中枢神经元中的表达,并观察该载体的细
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目的:该研究拟应用HSV-1载体,在导入体外原代培养的人胚神经元的基础上,将其接种于实验动物的嗅神经末梢,研究该载体中介LacZ基因在动物中枢神经元中的表达,并观察该载体的细胞毒性及实验动物的免疫学和病理学的改变,以建立应用HSV-1载体系统经外周神经到中枢神经元之间的无创伤性定向基因导入新技术,为神经机能的研究及神经系统疾病的基因治疗提供实验基础.结论:(1)该研究可制备出高滴度的HSV-1病毒载体,滴度为1×10<8>IP/ml;(2)该载体能感染体外培养的人胚神经元,并在其中表达lacZ基因,未发现细胞毒性改变;(3)应用该载体,可将外源基因自神经末梢导入到脑中枢神经系统特定部位;(4)被转染的细胞均为神经元,分布于皮质或神经核.胶质细胞未见被转染;(5)载体导入速度快,接种于嗅神经末梢后4天,即可在嗅皮质中枢及其与之有纤维联系的神经元中检测到报告基因的表达;(6)载体转染效率高,被转染的神经元最高可达70%左右;(7)导入的外源基因在中枢神经元可持续表达2个月以上;(8)该载体导入技术安全性好,未观察到实验动物出现明显的免疫学和病理学改变.
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