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第一部分重组人干扰素-γ对慢性肉芽肿病中性粒细胞胞外捕获网形成的影响目的:本研究以16例慢性肉芽肿病（CGD）患儿为研究对象,探索CGD病人胞外捕获网（NETs）形成功能,以及重组人干扰素-γ（rhIFN-γ）对CGD患儿中性粒细胞（PMN）活性氧（ROS）及胞外捕获网（NETs）形成的影响。方法:收集总结16例CGD患儿临床资料、实验室检查及基因突变特征。鲁米诺/异鲁米诺化学发光法检测rhIFN-γ处理后PMA、他莫西芬（Tamoxifen,Tam）或离子霉素（ionomycin）刺激PMN内外源性ROS的产量。酶标仪检测rhIFN-γ处理后PMA或Tam刺激PMN产生的NETs产量。在激光共聚焦扫描显微镜下观察PMA或Tam刺激PMN产生的NETs形态。结果:1.临床特征:16例男性患儿平均发病年龄3月,平均诊断年龄1岁4月,以反复发热（100%）、肺炎（100%）,淋巴结肿大（75%）、卡介苗病（62.5%）、腹泻（43.75%）、脓肿（43.75%）及肝脾肿大（25%）为主要表现。LPS刺激后NBT的变化范围为0%1%,PMN呼吸爆发刺激指数SI（0.99±0.34）范围在0.491.68,均为CYBB基因突变的XL-CGD。2.rhIFN-γ处理后PMN产生ROS情况:CGD患儿PMN在PMA、Tam或ionomycin刺激下,内外源性ROS产生较健康对照均明显缺乏。健康对照PMN在ionomycin刺激下处理组（3567.75±1486.6）较未处理组（2627.75±996.43）内源性ROS的产生明显增多（P<0.05）。而健康对照在Tam刺激下rhIFN-γ处理组（内源性:69.31±28.44,外源性:103.5±61.4）及未处理组（内源性:71.81±31.21,外源性:85.19±28.08）均较无Tam刺激的rhIFN-γ处理组（内源性:399.38±138.79,外源性:460.54±267.41）及未处理组（内源性:297.44±118.39,外源性:399.65±238.97）ROS的产生明显减少（P<0.0001）。3.rhIFN-γ处理后PMN产生NETs情况:PMA刺激下,CGD患儿NETs产生较健康对照均明显缺乏,健康对照处理组（1198.35±342.5）较未处理组（954.85±301.86）NETs的产生明显增加（P<0.05）。而Tam刺激下,CGD患儿处理组（2120.04±703.18）较未处理组（1615.82±526.28）NETs的产生明显增多（P<0.05）,健康对照处理组（2203±607.09）较未处理组（1827.02±453.34）NETs的产生也明显增加（P<0.05）,且CGD患儿有/无rhIFN-γ处理组NETs的产生较健康对照相应组均无显著差异（P值分别为0.331和0.771）。CGD患儿PMN单独用rhIFN-γ处理组（139.11±78.21）较rhIFN-γ+Tam组（2120.04±703.18）NETs产生缺乏（P<0.0001）。4.rhIFN-γ处理后PMN产生的NETs在激光共聚焦扫描显微镜下的形态:PMA刺激3h,CGD患儿NETs产生均明显缺乏,健康对照处理组较未处理组NETs产生明显增多;Tam刺激3h,CGD及健康对照处理组较未处理组NETs产生均明显增多,与Sytox Green荧光染色检测结果一致。结论:CGD患儿NETs形成功能明显缺乏,rhIFN-γ体外处理不能促进CGD患儿PMN内外源性ROS及ROS依赖途径的NETs产生,但能促进Tam刺激的ROS非依赖途径NETs产生,这可能是rhIFN-γ减少CGD反复感染的作用机制之一,为临床用rhIFN-γ和Tam协同预防治疗CGD感染提供了新思路。第二部分2例变异型X连锁慢性肉芽肿病临床及分子特征研究目的:探讨2例变异型X连锁慢性肉芽肿病（XL-CGD）患儿临床特征及PMN呼吸爆发试验、内外源性ROS产生、gp91phox蛋白表达、基因突变分子特征。方法:收集总结2例患儿（P17、P18）临床资料及实验室检查结果特征,流式细胞术检测患儿外周血PMN呼吸爆发功能,鲁米诺/异鲁米诺化学发光法检测患儿PMN经PMA、FMLP、WKYMVM及ionomycin刺激的PMN内外源性ROS的产量,流式细胞术检测患儿外周血PMN表面gp91phox蛋白表达水平,一代测序法分析CYBB基因DNA,TA克隆测序法分析c DNA。结果:1.临床特征:P17及P18发病年龄分别为8岁及4岁3月,诊断年龄分别为8岁4月及4岁7月,均明显晚于典型XL-CGD患儿。P17以大叶性肺炎、淋巴结肿大及肛周脓肿为主要表现,感染病原为洋葱伯克霍尔德菌及肺炎支原体,P18以发热、间质性肺炎及淋巴结肿大为主要表现,仅发现肺炎支原体感染。2.PMN呼吸爆发试验:两例患儿的SI为P17（2.52）和P18（3）,均明显低于健康对照的SI（100.35±43.72）,但均略高于典型XL-CGD的SI（0.99±0.34）。3.鲁米诺/异鲁米诺检测PMN内外源性ROS产生情况:2例患儿PMN在PMA、FMLP及WKYMVM刺激下,外源性ROS的产量均明显低于健康对照,但明显高于典型XL-CGD。而在PMA及ionomycin刺激下,内源性ROS的产量均明显低于健康对照,与典型XL-CGD类似。4.PMNgp91phox蛋白表达:P17（11.9%）及P18（3.14%）gp91phox蛋白表达均明显低于健康对照（87.82%±6.9%）,但均高于典型XL-CGD（0%）。5.一代测序:P17 CYBB基因第5外显子c.483+5G>A,为剪接突变,P18 CYBB基因第3外显子c.252G>A（p.A84A）,为同义突变。TA克隆测序:P17及P18 CYBB基因分别缺失第5及第3外显子。结论:X91-型CGD起病较晚,临床表现较轻,不易早期诊断,PMN可检测到少量呼吸爆发功能,应尽快检测PMN的ROS产生和gp91phox表达并行基因分析确诊。第三部分干扰素-γ受体1部分缺陷病临床及分子特征研究目的:探讨干扰素-γ受体1（IFNGR1）部分缺陷患儿临床及分子特征。方法:总结1例IFNGR1部分缺陷病患儿临床资料,Q-RT-PCR检测IL12-IFN-γ轴功能,流式细胞术检测IFNGR1蛋白表达,一代测序法分析IFNGR1基因。结果:患儿以播散性分枝杆菌感染为主要表现,常规免疫功能无异常,抗凝血经BCG+rh IFN-γ同时刺激后IL12B的表达水平比单独使用BCG刺激略有增加（P>0.05）,但较健康对照显著降低（P<0.05）;IFNGR1蛋白表达高于健康对照。基因测序发现患儿IFNGR1第6外显子存在c.819822del4（p.N274Hfs*2）杂合突变,父母均无此突变。结论:常染色体显性遗传IFNGR1基因部分缺陷病极为罕见,易发生播散性分枝杆菌感染,应尽早检测IL12-IFN-γ轴功能、相关蛋白表达并行基因分析确诊。