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目的:本实验研究以模拟寒凝证类痛经大鼠为研究对象,通过三个层面:子宫平滑肌收缩强度、子宫微循环及子宫内分泌相关分子受体表达,观察以两种不同刺激量(粗针深刺行手法及细针浅刺不行手法)针刺三阴交穴对寒凝证类痛经大鼠靶器官效应的影响,并分析其相关性,探寻不同针刺刺激量与“得气”之间的关系。方法:将雌性96只Sprague Dawley大鼠通过阴道涂片进行动情周期筛选后,按照随机数字表分为3个实验组,每组32只,每个实验组再分为4组,每组8只,包括盐水对照组、寒凝证类痛经模型组(简称模型组)、刺激量A组(采用粗针深刺行针的治疗方法,即期望“得气”组)和刺激量B组(采用细针浅刺不行针的治疗方法,即期望“不得气”组)。模型组及治疗组采用全身冷冻法结合苯甲酸雌二醇注射法建立寒凝证类痛经模型,于造模第10天统一针刺治疗及取材。实验分3个部分组成:包括子宫收缩强度,子宫微循环,子宫组织前列腺素E2受体mRNA、前列腺素F2α受体mRNA及缩宫素受体mRNA表达。第1部份采用BL-420F生物机能实验系统记录仪记录子宫收缩波及相关数值;第2部份采用XW-B-3冷光源微循环显微检查仪在固定视野内观察5、10、20min各管径及血流参数值;第3部份利用RT-PCR检测大鼠子宫组织前列腺素PGE2受体mRNA、PGF2α受体mRNA及缩宫素受体mRNA表达量。结果:1.子宫收缩强度:与盐水组相比,模型组子宫收缩波个数显著增加(P<0.01),子宫收缩波峰峰值显著升高(P<0.01),子宫活动度显著增加(P<0.01)。与模型组比较,刺激量A组(期望“得气”组)显著减少了子宫收缩波个数(P<0.01),并降低了子宫活动度(P<0.05),并且在减少子宫收缩波的个数方面与刺激量B组(期望“不得气”组)相比有显著差异(P<0.05);与模型组比较,刺激量B组(期望“不得气”组)在一定程度减少了子宫收缩波的个数,并降低了子宫活动度,但差异尚无统计学意义。2.子宫微循环:与盐水组比,模型组及各治疗组在各时间点大鼠子宫微血管管径明显收缩(P<0.01),毛细血管管径显著收缩(P<0.01),子宫微血管血流速度显著减慢(P<0.01);与模型组相比,刺激量A组(期望“得气”组)在针刺中各时间点大鼠子宫微血管管径及毛细血管管径显著扩张(P<0.01),刺激量B组(期望“不得气”组)在针刺中各时间点子宫微血管管径及毛细血管管径在针刺过程中,虽然有扩张,但差异没有统计学意义;另在针刺时间点上,刺激量A组(期望“得气”组)较刺激量B组(期望“不得气”组)针刺后子宫毛细血管管径扩张明显,其中5min及20min(P<0.05),10min(P<0.01),提示了刺激量A组(期望“得气”组)在针刺过程中行针的效应。在微循环血流状态方面,与模型组相比较,刺激量A组(期望“得气”组)在即刻针刺后大鼠子宫微血管血流明显改善(P<0.01),而刺激量B组(期望“不得气”组)无显着差别。3.子宫组织前列腺素E2受体mRNA、前列腺素F2α受体mRNA及缩官素受体mRNA表达:与盐水组比较,模型组PGE2受体mRNA及PGF2α受体mRNA表达增高(P<0.01)(P<0.05);与模型组比较,刺激量A组(期望“得气”组)PGF2α受体mRNA表达降低(P<0.05),PGE2受体mRNA表达降低(P<0.01);刺激量B组(期望“不得气”组)PGF2α受体mRNA及PGE2受体mRNA表达虽然降低,但差异没有统计学意义(P>0.05)。OTRmRNA表达各组之间差异没有统计学意义(P>0.05)。4.子宫收缩强度及子宫微循环相关性分析:微血管及毛细血管管径与子宫收缩波及子宫活动度均有负相关性(-1≤r<0)。5.大鼠子官组织前列腺素F2α受体mRNA表达与子宫收缩强度、子官微循环相关性分析:PGF2α受体mRNA相对表达量与子宫收缩波有正相关性(1≥ r>0),PGF2α受体mRNA相对表达量与子宫微循环微血管及毛细血管管径有负相关性(-1≤r<0)。结论:1.在寒凝证类痛经环境下,大鼠的子宫收缩强度加强、子宫微循环血管管径明显收缩、血流速度显着减慢及子宫组织PGE2受体mRNA、PGF2α受体mRNA相对表达量增高,这三者之间有密切的相关性。2.针刺三阴交穴可以改善寒凝证类痛经大鼠的子宫收缩强度、微循环及PGE2受体mRNA、PGF2α受体mRNA相对表达量。3.刺激量A组(期望“得气”组)的刺激量比较适合缓解寒凝证类痛经大鼠的子宫收缩强度、改善子宫微血管管径及减少子宫局部组织PGE2受体mRNA、PGF2α受体mRNA相对表达量。4.刺激量B组(期望“不得气”组)的刺激量在改善寒凝证类痛经大鼠的子宫收缩强度、微循环及PGE2受体mRNA、PGF2α受体mRNA相对表达量方面,虽然效果不及刺激量A组(期望“得气”组)好,但仍有一定的治疗作用。5.刺激量A组(期望“得气”组)(粗针深刺行手法)的刺激量较能达到针灸“得气”的效果。