论文部分内容阅读
目的评估猪脂肪供肝常温机械灌注(Normothermic machine perfusion,NMP)装置的保存和修复作用;初步探讨常温机械灌注猪脂肪供肝对原位肝移植受体术中及术后早期的影响。方法1.通过四环素+高脂+酒精饲料饲养8周,建立巴马小型猪中度脂肪肝模型8例,获取供肝随机分为两组。常温机械灌注组(NMP组)(n=4)放入37℃恒温NMP装置,予以供体猪血液稀释的灌注液(如表1-2)行门静脉和动脉持续灌注10h;威斯康辛大学(University of Wisconsin,UW)液静态冷保存(Static cold storage,SCS)组(SCS组)(n=4)浸泡于4℃UW液中保存10h。NMP组观察调整机械灌注期间肝动脉及门静脉压力及流量,检测并校正灌注液血气分析、血糖浓度以维持NMP装置运行稳定、正常氧分压、酸碱电解质及能量代谢平衡;观察灌注液丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转氨酶(AST)随时间变化趋势;记录每小时胆汁产量;两组均于灌注前后留取肝组织行常规病理检查。评估NMP装置的保存和修复作用。2.选取与供体相似体重、月龄的雄性、健康巴马小型猪受体8例,随机分为NMP组(n=4)、SCS组(n=4)。切除自体肝脏后,NMP组接受常温机械灌注10h的脂肪供肝,SCS组接受UW液冷保存10h的脂肪供肝,分别行原位肝移植术,记录两组术中基本情况;比较两组动脉开放时及术后0h至120h肝功能指标、存活率、死亡率及手术并发症;两组术后5d处死实验动物尸检,比较移植肝组织病理资料。判断脂肪供肝经常温机械灌注在原位肝移植中较传统UW液冷保存有无优势。结果1.NMP组在常温机械灌注过程中,门静脉、肝动脉压力以及流量,装置温度控制均稳定,灌注液酸碱度(PH)、氧分压(PO2)、电解质及血糖经校正后均保持设计范围内。灌注后灌注液ALT、AST均升高,至2h呈平稳下降趋势。灌注后胆汁产量逐渐升高,并维持在3-4ml/h,颜色金黄,性状清亮。经过10h机械灌注或冷保存,两组肝脏常规病理检查均显示肝脏组织结构尚清晰,均没有出现肝细胞广泛坏死,NMP组较SCS组肝细胞水肿、炎性浸润及肝窦扩张淤血程度较重,且NMP组灌注10h后较灌注前肝细胞内脂滴空泡变形,部分变小、破坏溶解。2.两组受体猪重量、供肝质量、受体手术时间、无肝期时间、门静脉开放至肝动脉开放时间、术中输液量无明显差异(P>0.05);NMP组术中出血量明显少于SCS组(P<0.05),开放后尿量明显多于SCS组(P<0.05)。术中门静脉开放后,两组均出现酸中毒,NMP组程度较轻。两组术后ALT、AST均升高,至24h后NMP组逐渐下降,SCS组ALT、AST下降缓慢或波动;两组术后TB均升高,NMP组至48h后逐渐下降,SCS组术后TB持续上升,但48h后上升趋势变缓;术后24h至120h,ALT、AST指标NMP组明显低于SCS组(P<0.05);术后48h至120h,TB NMP组明显低于SCS组(P<0.05);两组ALP、GGT术后早期上升不明显,96h后逐渐升高,组间ALP及GGT术后96h内差异不明显,96h以后NMP组明显低于SCS组(P<0.05)。术后NMP组4例均在1-2天内拔除气管插管,术后5天内全部存活;SCS组术后1例出现移植物原发无功能死亡,1例出现移植物延迟恢复,至术后5天尚未拔除气管插管。死亡猪及术后5d处死猪尸检未发现明显技术性并发症。移植肝病理活检显示NMP组较SCS组肝组织细胞损伤程度轻。结论1.本研究中的常温机械装置运行稳定,灌注猪脂肪供肝10小时,受损肝功能有所恢复,肝细胞损伤程度较冷保存轻,具有器官保存和修复作用。2.在原位肝移植术中,脂肪供肝经过10小时常温机械灌注可以一定程度减轻血流开放时再灌注损伤,促进术后早期移植肝功能恢复,降低移植物原发无功风险。