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目的:通过观察二甲双胍(Metformin)对人子宫内膜癌Ishikawa细胞株中REDD1蛋白表达的影响,及可能存在的REDD1/mTOR信号通路(独立于AMPK信号通路)在其中的作用,探讨REDD1对人子宫内膜癌细胞增殖影响。方法:取人子宫内膜癌细胞Ishikawa细胞株复苏,于含5%CO2、37℃培养箱中培养,培养液为含有10%FBS的RPMI 1640培养液,细胞达汇片后按5×105细胞/瓶接种于25 cm2培养瓶,每2天换一次细胞培养液。Ishikawa细胞体积达到90%左右时,改用不含血清的RPMI 1640培养液培养12h,再进行以下药物干预:二甲双胍1 mmol/l、5 mmol/l、10 mmol/l干预48小时,以等体积无血清的RPMI 1640培养液为对照组。干预后取各干预组细胞,MTT法测各组细胞增殖率,提取各组RNA及总蛋白,分别用RT-PCR及Western-blot检测各组REDD1、mTOR蛋白及基因的表达水平。结果:1、二甲双胍抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖,随着二甲双胍浓度的增加,细胞增殖的抑制率也随之增加,在10 mmol/L浓度时二甲双胍对细胞增殖的抑制作用最强(P<0.05)。2、二甲双胍能上调REDD1的表达及抑制mTOR的表达。1 mmol/l、5 mmol/l、10 mmol/l REDD1 mRNA的表达是对照组的1.09倍、1.15倍、1.29倍(P<0.05),差异有统计学意义。mTOR mRNA的表达是对照组的0.90倍、0.38倍、0.24倍(P<0.05),差异有统计学意义。3、二甲双胍能增加REDD1/mTOR信号通路中REDD1蛋白的表达,并抑制其下游mTOR蛋白的表达,REDD1蛋白的表达分别是对照组的4.29倍、4.45倍、8.66倍,mTOR蛋白的表达分别是对照组的0.70倍、0.51倍、0.20倍,均在10 mmol/l的浓度作用最显著,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:二甲双胍能明显上调REDD1的表达,REDD1/m TOR信号通路可能是调节Ishikawa细胞株增殖的关键信号通路之一。二甲双胍通过增加REDD1/mTOR信号通路中REDD1的表达及抑制mTOR的表达来发挥其对Ishikawa细胞株的抑制作用。提示REDD1可能在治疗人子宫内膜癌过程中发挥重要作用,且REDD1/mTOR信号通路参与了这一过程。