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大豆疫霉根腐病是大豆的一种重要病害,严重制约了大豆的生产。本研究首次在华南地区分离到了大豆疫霉菌,并测定了其毒力公式,命名为PGD1。此外,应用大豆疫霉菌菌株Pm14对华南地区的部分大豆育成品种和育种材料进行了抗病性评价,并在此基础上用抗、感材料构建群体,对抗病基因进行了定位。具体结果如下:
1.从大豆疫霉根腐病症状的病株中分离病原菌。通过形态特征观察,大豆疫霉菌特异PCR检测、核糖体DNA-ITS序列同源性比较和回接实验,证明病原菌为大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)。并应用国际通用的14个鉴别寄主,采用下胚轴伤口接种法进行生理小种鉴定,测得其毒力公式为1b,2,3a,4,5,6,7,命名为PGD1,该小种属新的生理小种。
2.采用下胚轴伤口接种法,用大豆疫霉菌菌株Pm14对419份国外引进资源、华南地区大豆育成品种,育种材料和273份野生大豆资源进行抗病性鉴定。栽培大豆鉴定出抗病资源60份,占鉴定资源总数的14.32%;中间反应类型有58份,占13.84%;感病的有301份,占71.84%。野生大豆资源中有9份表现为抗病,占总数的3.30%;45份表现为中间反应类型,占16.48%。从抗性资源的来源看,非洲资源表现出的抗病性最好,中国的次之。江西、湖南和广西三省野生大豆的抗性差别不大,栽培大豆的抗病性比野生大豆强。
3.以感病品种华春2号、抗病品种瓦窑黄豆为亲本,杂交后自交产生的191株F2代为定位群体对抗病基因进行定位。F2代群体经抗病性鉴定,有146株表现为抗病,45株表现为感病,抗感比符合3:1,表明抗病基因受显性单基因控制。在亲本间用覆盖大豆基因组的613对SSR标记进行多态性分析,其中210对具有多态性。从鉴定结果表现为感病的植株中选择9株,将它们的DNA等量混合作为感池,抗病亲本作为抗池,进行连锁分析。发现N连锁群上的4对引物在池中存在连锁关系,并将这4对引物应用于整个群体,经分析基因位于标记Satt631和Satt152之间,遗传距离分别为2.1cM和3.9cM,并将其命名为RpsWY。