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嗜盐微生物能在高盐环境条件下正常生长,由于具有特殊的细胞结构与代谢机制,近年来倍受关注。本研究以新疆达坂盐湖的沉积土壤为实验材料,通过选择性富集培养嗜盐菌,并提取嗜盐菌的总基因组DNA,以Na+/H+逆向转运蛋白基因缺陷株Escherichia coli KNabc为宿主,利用功能互补筛选策略,克隆获得2个新的Na+/H+逆向转运蛋白基因nhad1和nhar。nhadl预测编码含426个氨基酸、具有11个推测跨膜区的蛋白,分子量为45,826Da,等电点为6.84。与来自C. sticklandii DSM 519的砷泵蛋白家族之间的同源性最高(63%),与D.peptidovorans DSM 11002以及D. reducens MI-1来源的柠檬酸转运蛋白分别存在60%与61%的同源性,与C. novyi NT来源的NadC/P/Pho87蛋白家族有58%同源性,与P. thermopropionicum SI来源的NhaD Na+/H+逆向转运蛋白存在58%的同源性；nhar预测编码的蛋白由392个氨基酸构成,具有10个推测的跨膜区,分子量为41981.2 Da,理论等电点为9.52,与来自A. metalliredigens QYMF、A arabaticum DSM 5501以及C. tetani E88的Na+/H+逆向转运蛋白之间的同源性最高(65%),与来自Halanaerobium sp.和C. botulinum A2 str.的Na+/H+逆向转运蛋白分别存在63%与61%的同源性。携带nhadl和nhar的E. coli KNabc重组子,在含有不同浓度NaCl培养基中进行盐耐受性实验,以及在pH7.0-9.0的培养基中进行碱耐受性实验。研究结果显示,携带nhad1和nhar的E. coli KNabc菌株能够耐受0.5mol/L NaCl的盐浓度,对碱性pH的抗性要明显强于携带空载体的E.coli KNabc。表明nhadl和nhar能够提高E. coli KNabc在高盐碱条件下的生长能力。