基于LC-MS技术探讨高血压心衰心气阴虚证尿液代谢物及参麦注射液的干预机制

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目的:(1)研究高血压心衰心气阴虚证大鼠尿液代谢组学的特征,寻找潜在的差异性代谢物,为临床诊治高血压心衰提供实验依据。(2)研究参麦注射液干预高血压心衰大鼠尿液代谢物的变化,从小分子代谢物阐释参麦注射液治疗心衰作用机制,为临床运用中药制剂奠定基础。方法:将20只Dahl/SS盐敏感大鼠随机分为正常组(6只)和模型组(14只)。正常组大鼠给予低盐饮食(0.3%氯化钠浓度),模型组大鼠给予高盐饮食(8%氯化钠浓度),共喂养20周。将成模的14只大鼠按随机数字表法分为模型组和参麦注射液组,每组各7只。参麦注射液组以腹腔注射的方式进行给药,模型组给予灭菌注射用水,给药15天后,利用代谢笼收集正常组、模型组及参麦组大鼠的尿液样本,运用液相色谱-质谱(LC-MS)联用技术对三组的尿液进行分离与鉴别,使用多元统计学方法(主成分分析、偏最小二乘法分析等)寻找差异代谢物。通过Metabo Analyst在线分析软件筛选出差异性代谢通路。结果:(1)高血压心衰大鼠尿液代谢组学情况:正常组与模型组大鼠尿液的代谢特征存在明显差异,检测出具有统计学意义的代谢物包括脂质、氨基酸、糖类等在内的25种,代谢通路15条。其中模型组中的肌酸、烟酸、尿苷、顺式-乌头酸、1-甲基组氨酸、L-精氨酸、犬尿酸等物质的含量明显下降;泛酸、3-脱氢奎尼酸、5-L-谷酰基-牛磺酸等物质的含量显著上升,主要涉及精氨酸与脯氨酸代谢、泛酸和乙酰Co A的生物合成与三羧酸循环等代谢通路的变化。(2)参麦注射液干预高血压心衰大鼠尿液代谢组学情况:三组大鼠尿液的代谢特征存在明显差异,检测出具有统计学意义的代谢物包括脂质、氨基酸等在内的6种,代谢通路10条。与模型组比较,参麦注射液组中的L-精氨酸、肌酸、肌醇、4-吡哆酸、犬尿酸、5-L-谷酰基-牛磺酸的浓度向正常方向显著回调,主要涉及精氨酸与脯氨酸代谢、肌醇磷酸代谢等代谢通路的变化。结论:(1)25种小分子代谢物可作为高血压心衰心气阴虚证模型的差异代谢物,其与能量代谢、氨基酸代谢、糖代谢、脂代谢、嘌呤代谢等有关。(2)高血压心衰大鼠给予参麦注射液干预后可使异常的代谢物趋向正常,其治疗心衰的作用机制可能与调节氨基酸代谢、能量代谢及氧化应激反应等有关。
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