组织工程化可吸收缝线的实验研究

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目的:制备含有重组人骨形态发生蛋白-2(Recombinant Human bone morphogenetic Protein, BMP-2)和血管内皮生长因子(Recombinant Human Vascular Endothelial Growth Factor, rhVEGF)两种因子的壳聚糖(chitosan, CTS)纳米粒,将纳米粒复合于可吸收缝线(polydioxanone synthetic absorbable suture, PDS Ⅱ)上,研究其体外释放效果,为进一步研究载药缝线在体内释放效果等实验奠定基础。方法:1.采用离子交联法,在rhBMP-2浓度为50ng/ml, rhVEGF浓度为10ng/ml, CTS浓度为1mg/ml, TPP浓度为1.5mg/ml, CTS/TPP质量比为5:1的最优工艺条件下,制备载有rhBMP-2及VEGF的壳聚糖纳米粒,通过粒径测定仪测定其粒径大小及zeta电位,观察纳米粒形态,利用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)测定载药壳聚糖纳米粒的包封率。2.采用混合法,以聚已内酯为PDS Ⅱ膜改性及复合试剂,以二氯甲烷为溶剂,通过混合后将rhBMP-2-rhVEGF壳聚糖纳米粒复合于PDS Ⅱ上。3.采用体外恒温震荡法,对复合有载药纳米粒的PDS Ⅱ进行体外缓释实验,利用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)测定1、2、4、6、10、14、18、22、26天每个时间段所释放的药物浓度及药量。结果:1.所制备的rhBMP-2-rhVEGF壳聚糖纳米粒呈球形,粒径大小平均值为464.6±6.3nm, zeta电位为25.4±1.2mv, rhBMP-2包封率为90.6±1.8%, rhVEGF包封率为92.8±1.4%。2.通过混合法成功的将载药壳聚糖纳米粒复合于PDS Ⅱ上。3.复合有载药纳米粒的PDS Ⅱ分别在1、2、4、6、10、14、18、22、26天所释放的rhBMP-2含量平均值为95.375,179.052,85.037,62.275,63.844,60.324,65.717,76.642,59.631(pg), rhVEG含量平均值20.682,37.682,17.645,14.828,13.736,12.501,13.214,14.946,12.410(pg)。结论:1.利用聚已内酯可以将载药壳聚糖纳米粒复合于PDS Ⅱ上。2.通过本实验制备出的复合载药壳聚糖纳米粒的PDS Ⅱ具有良好的体外缓释性能。
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