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目的:观察巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)在肝癌细胞系中的表达情况,探讨siRNA介导的MIF基因沉默后对肝癌细胞系生物学特性的影响及潜在的分子机制。方法:采用实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)和Western blot技术检测MIF在正常肝细胞系L-O2与肝癌细胞系Huh7、Hep3B、BEL7402、PLC、HepG2、SMMC-7721中的mRNA及蛋白表达情况。采用脂质体法将化学合成的MIF-siRNA干扰序列转染肝癌细胞系SMMC-7721和HepG2,以MIF-siRNA转染的细胞系为实验组,以Con-siRNA转染的细胞系为对照组,采用CCK-8及EdU荧光法检测肝癌细胞系增殖情况;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况;Transwell小室法检测肝癌细胞系的迁移能力;采用Western blot法检测MIF及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、p53以及ERK/RSK2信号通路相关蛋白的水平。结果:RT-qPCR及Western blot结果显示,MIF在正常肝细胞系与肝癌细胞系中均表达,尤其在HepG2和SMMC-7721细胞中的相对表达量最高。CCK-8及EdU实验结果显示,与对照组相比,MIF基因沉默后可明显抑制肝癌细胞系的增殖;流式细胞术结果显示,实验组G0/G1期细胞所占百分比明显增加且凋亡率明显高于对照组;Transwell实验结果显示,MIF基因沉默后减弱了肝癌细胞系的迁移能力;Western blot结果显示,实验组细胞中Bcl-2表达水平下降,Bax及p53表达水平升高,实验组GSK-3β表达水平升高,p-ERK、p-RSK2、p-Bad和p-GSK-3β水平显著下调,而ERK、RSK2、Bad表达水平无显著变化。结论:MIF在肝癌细胞系中均呈高表达。siRNA介导的MIF基因沉默后,肝癌细胞系的增殖和迁移能力减弱,细胞周期被阻滞在G0/G1期,细胞凋亡率增加,抗凋亡蛋白Bcl-2减少,促凋亡蛋白p53和Bax增加,ERK/RSK2信号通路的相关蛋白水平发生明显变化。初步推测MIF基因沉默抑制肝癌细胞系增殖并促进凋亡可能通过调节ERK/RSK2信号通路实现的。