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研究目的:
1、探讨雌性西藏小型猪在不同生理状态下血液生化、生理指标和生殖激素水平的变化规律。
2、研究西藏小型猪生殖系统的发育、结构和功能,为西藏小型猪作为人类女性生殖系统疾病动物模型、研究生殖系统疾病提供依据。
研究方法:
1、生长发育过程(逐月)、整个发情周期(逐日)以及妊娠期(逐月)用前腔静脉采血法采集雌性西藏小型猪血液分离血清,应用放免法测定生殖激素和全自动生化分析仪测定各项生化指标:
2、SRY基因扩增法鉴定西藏小型猪胚胎性别;
3、采集妊娠20日龄、30日龄、40日龄、60日龄雌性西藏小型猪胚胎以及25日龄、44日龄、65日龄和成年的雌性西藏小型猪新鲜组织,中性福尔马林固定,制作常规正常组织切片,HE染色。
结果:
1、雌性西藏小型猪在生长发育过程不同月龄,各项生化指标和生殖激素水平变化情况如下:生化指标中ALT、TP、ALB、GLU、Ca、P、BUN的变化差异极显著(P<0.01),AST、LDH、Mg的变化有显著性差异(P<0.05),其余指标变化无显著性差异;生殖激素E2、FSH、LH、PRL水平变化差异极显著(P<0.01),T水平变化有显著性差异(P<0.05),P4水平变化无显著性差异。
2、雌性西藏小型猪在发情周期不同天数,各项生化指标和生殖激素水平变化情况如下:生化指标中P、CHO水平差异极显著(P<0.01),Glu、AST、LDH、TP、ALB水平有显著性差异(P<0.05),其余指标变化无显著性差异;生殖激素中P4水平差异极显著(P<0.01),E2水平有显著性差异(P<0.05),其余各项激素水平变化无显著性差异。
3、雌性西藏小型猪在妊娠不同月龄,各项生化指标变化无显著性差异;生殖激素中E2水平变化差异极显著(P<0.01),其余各项激素水平变化无显著性差异;生理指标中LYM、NEU水平变化差异极显著(P<0.01),其余指标变化无显著性差异。
4.应用所设计的引物扩增出条带大小为412bp的片断,与预期结果吻合,鉴定了西藏小型猪胚胎20个,其中8个为雌性。
5.妊娠40天时,雌性西藏小型猪胚胎已形成卵巢,并观察到子宫,此时子宫未见到子宫腺体;60天胚胎卵巢组织结构接近新生仔猪,有大量原始卵泡,子宫腺体发达;出生后25日龄仔猪,卵巢组织初级卵泡占皮质主要成分,有少量无腔生长卵泡,无次级卵泡、成熟卵泡和黄体,初级卵泡的卵泡细胞由单层扁平变为单层立方、柱状或增生至多层;44日龄仔猪卵巢皮质仍以初级卵泡为主,有较多无腔生长卵泡并且有腔卵泡泡径有所增大,无成熟卵泡和黄体;65日龄仔猪卵巢皮质浅层有初级卵泡分布,有腔卵泡体积增大,卵泡细胞间出现卵泡腔,无成熟卵泡和黄体;成年后西藏小型猪卵巢生长卵泡间分布,有腔生长卵泡和无腔生长卵泡间分布,大小不一,有腔生长卵泡泡径继续增大,有成熟卵泡和黄体。黄体与其它猪种的相同,无黄体色素呈淡粉红色。西藏小型猪输卵管壶腹部的黏膜层和黏膜下层的混合层发生高度皱褶,与马属动物相似。西藏小型猪子宫内膜上皮与反刍动物相同,为单层柱状或假复层柱状上皮。
结论:
1.雌性西藏小型猪在不同的生理状态下,其生化生理指标和激素水平呈规律性变化,并且这种变化能够反映雌性西藏小型猪所处的生理状态。
2.西藏小型猪雌性生殖系统胚胎时期40日龄可观察到卵巢,60日龄时卵巢有大量原始卵泡,子宫腺体发达;成年后卵巢生长卵泡间分布,有成熟卵泡和黄体,无黄体色素;输卵管壶腹部的黏膜层和黏膜下层的混合层发生高度皱褶;子宫内膜上皮为单层柱状或假复层柱状上皮。
3.SRY基因可用以鉴定西藏小型猪胚胎性别。