肾脏是人体的重要器官,它可以维持电解质及酸碱平衡,还有内分泌功能。肾脏对糖稳态的调控主要通过糖异生和葡萄糖重吸收。肝细胞核因子1α（Hepatocyte Nuclear Factor,HNF1α）是一种可在肝脏、肾脏、胰腺和消化道等表达的转录因子,其对肾脏及肾小管上皮细胞的分化有重要作用,HNF1α功能缺失也会引发肾糖代谢相关疾病例如肾范可尼综合征（Fanconi Syndrome,FS）。而HNF1α作为转录因子需要乙酰转移酶作为辅激活因子来使其发挥功能。本课题依据HNF1α的生物学特性,研究其对肾脏葡萄糖重吸收的分子机制。我们构建了小鼠HNF1α表达载体,将重组质粒转染进人胚肾细胞系HEK293T细胞和人肾小管上皮细胞系HK2细胞中,采用流式细胞仪检测荧光葡萄糖类似物2-NBDG被细胞吸收的情况,发现HNF1α能促进细胞对2-NBDG的吸收。通过实时定量PCR检测HNF1α下游靶基因如GLUT2、SGLT2、INSIG1等的m RNA水平,发现过表达HNF1α使得肾脏有关糖转运蛋白基因如GLUT2和SGLT2的表达水平上升。GLUT2是葡萄糖转运蛋白,荧光素酶报告基因实验检测发现过表达HNF1α增强GLUT2报告基因的活性,干涉HNF1α则抑制GLUT2报告基因活性。通过EMSA和Ch IP实验发现HNF1α与GLUT2的启动子直接结合。实验室前期研究发现HNF1α的乙酰化位点Lys117在小鼠体内对肾脏葡萄糖重吸收具有重要作用。我们利用报告基因实验发现HNF1αK117突变后对GLUT2报告基因的转录激活能力明显下降。组蛋白乙酰转移酶PCAF能够以剂量依赖的方式上调HNF1α的转录活性,但对K117突变体的调节作用明显变弱;免疫共沉淀实验结果显示K117突变并不影响PCAF与HNF1α的蛋白质相互作用,但K117突变影响HNF1α与另一个乙酰转移酶CBP的相互作用,而且PCAF可以显著促进HNF1α与CBP的相互作用,当K117突变后,PCAF的促进作用明显减弱。综上所述,HNF1α通过调控GLUT2的转录活性促进肾小管上皮细胞葡萄糖重吸收,这一作用与HNF1α的乙酰化位点K117密切相关。PCAF通过促进HNF1αK117与CBP的蛋白质相互作用调节HNF1α的转录活性,CBP和PCAF对HNF1αK117的协同调控作用为HNF1α功能的研究提供新思路,也为肾糖代谢方面疾病研究提供新方向。