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目的Raf-1激酶抑制蛋白(Raf-1 kinase inhibitory protein,RKIP)能抑制p38丝裂原激活蛋白激酶(p38-Mitogen-activated protein kinase,p38-MAPK)的表达及活化,但RKIP/p38-MAPK信号通路对DR状态下神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)的影响尚不清楚,本研究拟探讨该通路在DR状态下对RGC的影响及机制。方法将48只雄性清洁级SD(Sprague Dawley)大鼠按随机数字表分为4组:对照组,糖尿病组,阴性治疗组和RKIP组。除对照组外,其他各组均腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)以建立糖尿病模型。糖尿病模型建成第2周,RKIP组和阴性治疗组玻璃体内分别注射携带RKIP基因片段的重组慢病毒(LV-RKIP)和携带无意义核苷酸序列的重组慢病毒。12周后利用Western blot检测RKIP、p38-MAPK、caspase-3在视网膜中的含量;免疫荧光检测胶质细胞纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、RKIP、p38-MAPK和胶质细胞谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)以及谷氨酸转运体(L-glutamate/L-asparate transporter,GLAST)在视网膜Müller细胞中的表达量;谷氨酸含量检测试剂盒检测大鼠视网膜谷氨酸含量;HE染色检测RGC密度。结果在免疫荧光结果中显示,糖尿病组和阴性治疗组与对照组相比GFAP表达明显增加(P<0.01);而RKIP组与糖尿病组相比GFAP明显下降(P<0.01)。糖尿病组和阴性治疗组与对照组相比RKIP表达明显减少(P<0.01);而RKIP组与糖尿病组相比RKIP表达明显增多(P<0.05)。糖尿病组和阴性治疗组与对照组相比p38-MAPK表达明显增多(P<0.05);RKIP组与糖尿病组相比p38-MAPK表达明显减少(P<0.01)。糖尿病组和阴性治疗组与对照组相比,GS表达明显减少(P<0.01);RKIP组与糖尿病组相比,GS表达明显增多(P<0.01)。糖尿病组和阴性治疗组与对照组相比,GLAST表达明显减少(P<0.01);RKIP组与糖尿病组相比,GLAST表达明显增多(P<0.01)。以上结果说明,上调RKIP减少了视网膜Müller细胞的活化。进一步分析视网膜损伤程度,Western blot结果显示,糖尿病组和阴性治疗组与对照组相比,视网膜中caspase-3和p38-MAPK表达增多(P<0.05),RKIP表达明显减少(P<0.01);RKIP组与糖尿病组相比,caspase-3和p38-MAPK表达减少(P<0.01),RKIP表达明显增多(P<0.05)。与此同时,视网膜突触谷氨酸含量检测表明,糖尿病组和阴性治疗组与对照组相比,视网膜的突触谷氨酸含量明显增加(P<0.05);RKIP组与糖尿病组相比,视网膜突触谷氨酸含量减少(P<0.01)。进一步分析视网膜RGC损伤情况,HE染色表明,糖尿病组和阴性治疗组与对照组相比,视网膜RGC数量减少(P<0.01);RKIP组与糖尿病组相比,视网膜RGC数量增加(P<0.05)。结论RKIP能抑制p38-MAPK信号通路,恢复GLAST和GS在糖尿病视网膜Müller细胞中的表达,抑制胶质细胞活化,减少RGC的缺失。