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目的:观察二氢杨梅素(Dihydromyrieetin,DMY)对柠檬酸铁胺(ferric ammonium citrate,FAC)诱导大鼠肝星状细胞系HSC-T6细胞活化的影响及机制,为肝纤维化的防治提供新的思路和线索。方法:培养大鼠肝星状细胞系HSC-T6细胞,先用细胞自噬诱导剂雷帕霉素(100 nmol/L)预处理HSC-T6细胞0.5 h,再用含FAC(400μmol/L)和不同浓度的DMY(10、20、40、80、160和320μg/mL)处理HSC-T6细胞24 h。实验分为以下各组:空白对照组、FAC组、不同浓度的DMY干预组、FAC组+不同浓度DMY组、雷帕霉素预处理组。采用MTT法检测细胞活力,普鲁士蓝染色观察细胞内铁沉积,采用ELISA法检测细胞培养液上清中透明质酸(Hyaluronic acid,HA)、层粘连蛋白(Laminin,LN)、三型前胶原(ProcollagenⅢ,PCⅢ)和IV型胶原(Collagen IV,IV-C)水平,采用比色法检测细胞内总铁水平,采用透射电镜观察HSC-T6的超微结构。采用Western Blot检测HSC-T6细胞中NCOA4、FTH1、LC-3和p62的表达。结果:1.与空白对照组比较,FAC组细胞中α-SMA蛋白表达和细胞培养上清中HA、LN、PcⅢ和IV-C的水平均显著性增加(P<0.05);与FAC组比较,DMY(20、40、80、160和320μg/mL)+FAC组细胞中α-SMA蛋白表达和细胞培养上清中HA、LN、PcⅢ和IV-C的水平均显著性降低(P<0.05)。2.与空白对照组比较,FAC组细胞内铁沉积和总铁水平明显增加(P<0.05);与FAC组比较,DMY(20、40、80、160和320μg/mL)+FAC组细胞内铁沉积和总铁水平显著性降低(P<0.05)。3.与对照组比较,FAC组HSC-T6细胞中自噬体的数量明显增加,NCOA4、FTH1和LC3-Ⅱ的表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值显著性增加(P<0.05),p62蛋白表达水平显著性下调(P<0.05);与FAC组比较,DMY(40μg/mL)+FAC组HSC-T6细胞中自噬体数量明显减少,NCOA4和LC3-Ⅱ的表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值均显著性降低(P<0.05),FTH1和p62的蛋白表达水平显著性上调(P<0.05)。4.与FAC+DMY(40μg/mL)组比较,FAC+DMY(40μg/mL)+雷帕霉素组细胞中α-SMA蛋白表达、细胞培养上清中HA、LN、PcⅢ和IV-C的水平、细胞内铁沉积水平和总铁水平显著性增加(P<0.05)。结论:二氢杨梅素通过铁自噬途径抑制铁过载诱导的肝星状细胞活化。