卡琪花蒂玛中黄酮类物质的抗氧化活性及吸收特性研究

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卡琪花蒂玛(Kacip fatimah)属于紫金牛科植物,学名为Labisia Pumila,与燕窝、锡器、东革阿里并称马来西亚四大国宝,是马来西亚妇女们历代以来常用的一种红色中草药。目前关于卡琪花蒂玛的研究主要集中在对其水提物、醇提物等粗提物的研究,而对卡琪花蒂玛茎和叶中具体的有效成分以及分离纯化条件暂时还未见有人报道。黄酮类化合物作为其中重要的一种生物活性成分,具有极强的抗氧化活性,并且其抗氧化活性又与黄酮类物质的组成成分和比例有关,因此本文研究了卡琪花蒂玛茎和叶中黄酮类物质的提取条件,基本组成成分及其抗氧化活性,为其在抗衰老化妆品行业的开发利用提供理论基础;同时本文还通过体外模拟消化及小肠吸收实验对卡琪花蒂玛黄酮的吸收特性进行研究,对其在保健品行业的开发利用提供理论依据。本研究的主要结果如下:(1)采用响应面实验对影响卡琪花蒂玛黄酮提取率的料液比、乙醇浓度、提取温度和提取时间四个因素进行优化研究,得到最优的提取条件为:料液比1:60、乙醇体积分数35%、提取温度85℃、提取时间90 min,黄酮的提取量为39.15 mg/g DW。经过AB-8大孔树脂纯化之后,叶黄酮含量(381.20μg rutin/mg DW)提高了将近4.5倍;茎黄酮含量(667.22μg rutin/mg DW)提高了将近8.1倍。通过LC-MS鉴定了卡琪花蒂玛茎和叶中黄酮类物质,茎(S40)的黄酮类化合物检测出11种,其含量的顺序是:儿茶素>表儿茶素>白杨素>葛根素>芦丁>芹菜素>表没食子儿茶素>槲皮素>染料木素>木犀草素>杨梅素;叶(L40)的黄酮类化合物检测出10种,其含量的顺序是:芦丁>儿茶素>表没食子儿茶素>山奈酚>表儿茶素>槲皮素>杨梅素>染料木素>芹菜素>葛根素。(2)采用化学抗氧化法、人肝癌细胞模型及人红细胞氧化溶血模型对卡琪花蒂玛茎和叶中黄酮的抗氧化活性进行评价。实验结果表明,卡琪花蒂玛茎和叶中黄酮的抗氧化能力在不同的抗氧化体系中均有显著效果:其中叶子中黄酮对DPPH、ABTS自由基清除能力相对较好,IC50值分别为0.99、2.26μg Rutin/mL;CAA实验表明茎(S40)和叶(L40)的CAA值分别为:0.28和3.03μmol of Qu/100g powder,S40的抗氧化活性>L40的抗氧化活性;红细胞氧化溶血实验结果表明卡琪花蒂玛茎和叶的黄酮可以很好地抑制红细胞的氧化溶血。总体来看,卡琪花蒂玛黄酮具有较好的抗氧化活性。(3)通过测定经过体外模拟胃肠消化之后的黄酮抗氧化活性来判定其在胃、肠消化过程中的抗氧化活性是否发生变化。实验结果表明不同消化时间段的样品对ABTS自由基的清除能力和对Fe3+的还原能力没有显著影响,而对DPPH自由基的清除能力在经过肠消化时显著增强;红细胞溶血实验结果表明胃肠道消化系统并没有明显改变茎(S40)和叶(L40)黄酮的细胞的抗氧化活性,ROS、MDA、GSH、GSH-Px和SOD的实验结果均表现出在胃消化的过程中,它们几乎未发生较大的变化,在肠消化的过程中均发生了较大的波动,但是在肠消化的第6小时的实验结果与在胃消化的第0小时的实验结果几乎一致。(4)本研究采用Caco-2细胞模型对卡琪花蒂玛黄酮的吸收特性进行初探。研究结果表明卡琪花蒂玛黄酮均具有良好的吸收特性,并且叶中黄酮比茎黄酮更易于吸收。
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