【摘 要】
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牛蒡为药食同源的菊科两年生草本植物,含有多糖、五环三萜以及多酚等多种活性成分。熊果酸和齐墩果酸为一对互为同分异构体的五环三萜类化合物,具有类似的分子结构和药理学活性。天然植物中两者往往同时存在,因此齐墩果酸和熊果酸之间存在协同作用的研究有助于功能成分的利用。齐墩果酸和熊果酸水溶性差,生物利用度低,极大的限制了其在食品及药品行业的应用,因此本文构建了基于牛蒡多糖为载体的齐墩果酸和熊果酸的递送系统以改
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牛蒡为药食同源的菊科两年生草本植物,含有多糖、五环三萜以及多酚等多种活性成分。熊果酸和齐墩果酸为一对互为同分异构体的五环三萜类化合物,具有类似的分子结构和药理学活性。天然植物中两者往往同时存在,因此齐墩果酸和熊果酸之间存在协同作用的研究有助于功能成分的利用。齐墩果酸和熊果酸水溶性差,生物利用度低,极大的限制了其在食品及药品行业的应用,因此本文构建了基于牛蒡多糖为载体的齐墩果酸和熊果酸的递送系统以改善其水溶性并探究二者之间的协同抗炎活性。主要研究结果如下:（1）利用硫酸铜诱导的转基因斑马鱼为抗炎实验模型,对不同比例的齐墩果酸与熊果酸（0∶1、1∶3、1∶1、3∶1、1∶0）进行抗炎活性评价。结果显示,当两者比例为1∶1时抗炎效果最好,巨噬细胞数量较模型组下降29.55%-51.14%,与模型组相比具有显著性差异。（2）利用反溶剂沉淀法合成纳米颗粒,测定其包封率并通过粒径、电位、FTIR、热重、XRD、透射电子显微镜以及扫描电镜等对其进行表征,所得纳米颗粒的包封率为48.98%±3.77%,负载量为0.96%±0.07%,牛蒡多糖平均粒径为178.2±1.3nm,ALP-OA/UA粒径为199.1±4.7 nm,牛蒡多糖电位为-9.65±0.88 m V,ALPOA/UA电位为-7.15±1.17 m V。由扫描电镜及透射电镜结果可以看出所制备纳米颗粒为疏松的网络结构。热重结果显示,多糖及纳米颗粒的热稳定性差距不大。红外光谱显示牛蒡多糖对齐墩果酸和熊果酸的包封主要涉及羟基的O-H键和C-O基团或O-CO结构。XRD显示齐墩果酸及熊果酸经多糖包封后由晶体结构转变为易溶于水的无定型结构。（3）采用硫酸铜诱导的转基因斑马鱼为抗炎实验模型和脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎症模型对多糖及纳米颗粒的抗炎活性进行评价。细胞炎症模型中不同浓度的多糖溶液可以使NO的含量下降19.37%-48.66%,而不同浓度的纳米颗粒溶液可以使NO含量较模型组下降30.09%-64.58%,二者均具有一定的抗炎效果;斑马鱼炎症模型中,与齐墩果酸-熊果酸组合（质量比为1∶1,较模型组最大减少51.14%）相比,ALP-OA/UA纳米颗粒添加后最大减少54.90%,且通过PCR分析表明,多糖及纳米颗粒均可以通过下调NF-κB信号通路中的NF-κB2、TNF-α、IL-1β和IL-8来达到抗炎效果。（4）探究了纳米颗粒在不同的pH、温度、离子浓度条件下的稳定性以及对斑马鱼肠道蠕动的影响,ALP-OA/UA在pH为2.0-9.0、温度为30-90℃、盐溶液为0-100m M和储存30天等条件下表现出优异的稳定性。对斑马鱼肠道蠕动的影响中ALPOA/UA组的荧光强度较模型组分别下降49.08%、39.72%和9.13%,牛蒡多糖组中较模型组分别下降19.74%、40.57%和33.46%。
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