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弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种机会性致病的专性细胞内寄生原虫,可感染包括哺乳动物和鸟类在内的所有温血动物,据估计全球约有三分之一的人口受感染。通常对弓形虫病的检测及诊断主要依靠病原分离法、免疫学检测。近些年,利用PCR直接检测待检样品中寄生虫DNA的分子生物学的方法逐渐得到认可并得到广泛应用。PCR检测的敏感性取决于靶基因的拷贝数,B1基因是弓形虫基因组上的一段35倍重复的多拷贝的基因序列,是弓形虫检测中常常使用的靶基因。蝙蝠肝组织的弓形虫巢式PCR检测本研究从我国云南省、广西省及缅甸共和国共采集12个种1158只蝙蝠样本,其中云南省475只、广西省133只、缅甸550只。通过B1基因的巢式PCR检测蝙蝠肝组织中弓形虫DNA。实验结果表明,弓形虫平均阳性率为19%,其中云南省6.74%、广西省20.3%、缅甸29.27%,地区间感染阳性率差异极显著(P<0.01)；同地区不同蝙蝠间阳性率差异极显著(P<0.01)；不同地区同种蝙蝠阳性率差异极显著(P<0.01)。蝙蝠脑组织的免疫荧光抗体检测通过免疫荧光抗体试验检测蝙蝠脑组织切片的弓形虫抗体,并比较PCR检测阳性率确定诊断结果的准确性。实验结果表明,免疫荧光抗体检测蝙蝠样品阳性率(16.67%)与PCR检测结果差异不显著(P>0.05)。限制性片段长度多态性PCR基因分型基因分型是通过分子生物学手段阐明个体基因型的方法,但目前亚洲地区关于弓形虫基因分型的研究还很有限。本研究利用12个弓形虫基因标记,分别是SAG1、5’-SAG2、3’-SAG2、alt.SAG2、SAG3、BTUB、GRA6、 C22-8、C29-2、L358、PK1和Apico,通过限制性片段长度多态性PCR对弓形虫分离株进行基因分型。220份阳性样品的限制性片段长度多态性PCR有43份样品在多个基因标记分型成功,包括5份基因Ⅰ型、6份为ToxoDB基因型库中非典型型、32份新的非典型型,蝙蝠的弓形虫种群分布呈现多态性。