本研究以药典收载品种银翘解毒颗粒为研究对象,根据组方各药味剂量、成分特性,利用现代分析技术,建立银翘解毒颗粒HPLC特征图谱和多成分含量测定方法,进一步提高该制剂的现行标准,通过建立的含量测定方法评价不同生产厂家生产的银翘解毒颗粒制剂质量,对同一个厂家不同批次间工艺稳定性、质量一致性等进行掌控。另外考虑到处方中有主要药味金银花,金银花自从和山银花品种分列之后,药典规定只有忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或带初开的花作金银花使用,市场上金银花价格也比山银花高很多,所以本次课题还增加了银翘解毒颗粒中山银花的检查,考察是否有厂家存在违规投料等情况。目的(1)建立银翘解毒颗粒HPLC特征图谱,为银翘解毒颗粒质量评价提供参考(2)建立银翘解毒颗粒多成分含量测定方法,进一步提高银翘解毒颗粒质控标准(3)建立银翘解毒颗粒中检查山银花的薄层色谱鉴别方法,完善质量标准方法(1)采用溶剂超声提取方法对银翘解毒颗粒中主成分进行提取,结合色谱、光谱、质谱等现代分析方法,通过对单味药同时测定,确定各成分归属；通过色谱条件优化,建立银翘解毒颗粒HPLC特征图谱,通过对照品对照和质谱手段对特征峰进行指认。采用Zorbax XDB C18柱(150×4.6mm,5μm)色谱柱,乙腈(A)-0.1%甲酸(B)为流动相进行梯度洗脱(0～10min,5%A→15%A;20～45min,15%A→22%A；45～80min,22%A→52%A),柱温：30℃,流速：1.0ml/min,检测波长：245nm；采用对照品对照法和质谱法,对特征峰进行指认。(2)建立同时测定银翘解毒颗粒中绿原酸、连翘酯苷A.牛蒡苷、甘草酸铵的含量测定方法。(3)用薄层色谱方法检查银翘解毒颗粒中山银花特征成分灰粘毛忍冬皂昔乙,再用高效液相色谱方法进一步确证。结果(1)通过高效液相色谱法并结合光谱和液质联用技术进行分析,以连翘酯苷A峰为参照物峰,计算各主要色谱峰的相对保留时间,建立银翘解毒颗粒HPLC特征图谱,确定了共有特征峰19个,并指认了新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、连翘酯苷A、连翘酯苷B、连翘酯苷C、连翘苷、牛蒡苷、甘草苷、甘草酸铵共10个特征峰。对不同厂家生产的银翘解毒颗粒HPLC特征图谱进行分析,结果表明不同厂家生产的样品,除了绿原酸含量普遍比较高之外,其他化学成分存在较大差异。(2)利用已建立的银翘解毒颗粒HPLC特征图谱方法,选择金银花、连翘、牛蒡子、甘草中一种主要活性成分进行同时含量控制,绿原酸、连翘酯苷A、牛蒡苷、甘草酸铵分别在进样量6.204-279.2、2.016-90.72、13.40～60.29和1.660～74.70ng范围内呈良好的线性关系；绿原酸、连翘酯苷A、牛蒡苷、甘草酸铵的平均回收率分别为99.79%、99.58%、98.56%、100.2%。(3)用薄层色谱法对银翘解毒颗粒进行鉴别,所建立的薄层色谱斑点清晰。测定的56批样品结果显示,有13个厂家中检测出灰粘毛忍冬皂苷乙。结论(1)建立的银翘解毒颗粒HPLC特征图谱方法,操作简单,有较好的重复性和稳定性,可为该制剂的标准提高提供更全面的依据；(2)建立了银翘解毒颗粒中多指标含量测定方法,可同时控制特征图谱中4个成分的含量,方法简便、准确,可为控制该制剂质量提供更有效的方法,也为综合评价该制剂提供参考价值(3)利用薄层色谱方法检查银翘解毒颗粒中山银花的存在,该方法简便、操作简单,为更好地控制银翘解毒颗粒的制剂质量提供科学依据,规范企业生产行为。