银杏叶多糖的分离纯化及结构分析

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银杏被视作植被界的“活化石”,具有重要的探究价值。本文以银杏叶多糖为探究对象,构建系统分离纯化方法,并对纯化得到的均一多糖进行结构鉴定。  本文考察得到银杏叶粗提多糖最优的水提醇沉工艺,得到的粗多糖利用DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱层析与Sepharcyl-300凝胶柱层析进行分离提纯,得到4种均一多糖PGBL1A、PGBL1B、PGBL2A、PGBL2B。通过分子量检测、单糖组成分析对其进行初步结构鉴定,重均相对分子质量Mw分别为1.4×104、9.0×103、1.2×105、3.0×104。PGBL1A由鼠李糖,半乳糖醛酸,半乳糖与阿拉伯糖组成,摩尔比2.13∶1.00∶2.50∶6.88;PGBL1B由甘露糖,鼠李糖,葡萄糖醛酸,半乳糖醛酸,半乳糖与阿拉伯糖组成,摩尔比1.00∶3.50∶1.00∶1.50∶6.75∶11.50;PGBL2A由甘露糖、鼠李糖与葡萄糖醛酸组成,摩尔比2.19∶1.57∶1.00;PGBL2B由甘露糖,鼠李糖,葡萄糖醛酸,半乳糖醛酸,半乳糖与阿拉伯糖组成,摩尔比2.50∶4.83∶3.83∶1.00∶3.00∶3.00。通过甲基化分析、FT-IR、NMR等手段对PGBL2A糖苷链的连接方式进行研究,推测出PGBL2A的结构信息包括:T-β-L-Rhap-(1→)、(1→2,4)-Rhap、(1→2,3)-Manp、β-D-GlcpA-(1→)、(1→2)-GlcpA、(1→4)-GlcpA、(1→3)-GlcpA、(1→3,4)-GlcpA、(1→2,4)-GlcpA这9种糖苷连接方式。  用OH·和ABTS+·自由基体系评价银杏叶多糖的抗氧化生物活性。结果表明银杏叶多糖具备一定的清除OH·和ABTS+·自由基的能力,且随着浓度增高,抗氧化活性越强。
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