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目的:DEK是广泛存在于细胞核内高度保守的可磷酸化癌蛋白,在人类许多恶性肿瘤中均出现过表达,表现出与肿瘤的发生发展密切相关。DEK可通过改变染色质结构,修复DNA,参与mRNA剪接与信号通路,或作为转录因子等途径调控细胞的增殖、分化、凋亡、迁移、衰老等,与肿瘤细胞的形成有着重要的关系。目前关于DEK促进肿瘤发展的研究越来越多,然而关于DEK与肺癌的关系以及DEK在肺癌中的作用机制尚未有完善的研究成果。前期研究结果显示,DEK蛋白在人肺癌肿瘤组织中的表达量明显高于正常组织,提示DEK可能在肺癌的发病机制中发挥重要作用,因此本研究在前期工作的基础上,进一步在细胞层面上研究DEK沉默对肺癌细胞转录组的影响,并深入探讨DEK在肺癌中的作用机制,为肺癌的治疗提供新的途径与实验依据。方法:本实验通过实时荧光定量RT-PCR与Western Blotting检测6种肺癌细胞系中DEK表达水平差异,从中筛选出内源性高水平表达DEK的细胞,并通过RNAi慢病毒载体构建DEK沉默的A549细胞,通过RNA-Seq检测由DEK沉默诱导的差异表达基因,再通过GO分析与Pathway分析评估差异表达基因与肺癌的关系,最后在细胞层面上验证分析的准确性,通过MTT法检测DEK沉默对A549细胞增殖能力的影响,PI染色法检测DEK沉默对A549细胞周期的影响,Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒检测DEK沉默对A549细胞凋亡的影响,此外,通过实时荧光定量RT-PCR与Western Blotting检测IGFBP3/IGF-1R/AKT通路相关基因的表达水平。结果:通过GO分析与Pathway分析评估DEK沉默的A549细胞中差异表达基因与肺癌的关系,结果显示DEK与细胞生长和死亡密切相关。进一步,使用DEK siRNA转染A549细胞,检测DEK沉默对A549细胞功能的影响,结果显示DEK沉默可抑制A549细胞的增殖,引起A549细胞周期在G1期发生阻滞,而且能够显著促进细胞的凋亡。最后检测IGFBP3/IGF-1R/AKT通路相关基因表达量与DEK表达水平的关系,结果显示,IGFBP3基因表达量与DEK的表达水平呈负相关关系,IGF-1R、p-AKT、AKT基因表达量与DEK的表达水平呈正相关关系。结论:综上实验结果我们得出结论,DEK沉默可以引起A549细胞周期G1期阻滞,抑制A549细胞的增殖,并能显著促进细胞的凋亡,且其分子机制与IGFBP3/IGF-1R/AKT 通路相关。