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背景: 线粒体脑肌病是一大类少见的代谢性肌病，主要由于线粒体基因突变或核突变引起线粒体功能障碍，ATP缺乏进而引起一系列组织和器官功能异常，其临床表现异质性大，线粒体脑肌病伴高乳酸血症和卒中样发作(mitochondrialencephalomyopathy with lactic acidemia and stroke likeepisodes，MELAS)是线粒体脑肌病中最常见的类型之一，是一组以脑卒中样发作为主要特征的线粒体脑肌病，可伴进展性痴呆。该病好发于青少年，其他临床表现复杂多样，主要累及脑和骨骼肌，也可表现为身材矮小、听力损害、糖尿病以及胃肠道症状等，线粒体功能缺失的证据包括乳酸升高和肌活检发现破碎红纤维(RRF)。多年来，国内有不少对本病的相关报道，但是，多数为个案或少数病例报道，较大样本的报道仍不多，为此，我们对确诊为MELAS的35例患者进行临床与病理总结分析，并对其进行线粒体基因检测，对不同线粒体基因突变的临床特点加以总结，也有助于对该病的认识。 目的: 1.总结分析MELAS患者的临床表现、辅助检查、病理表现及它们彼此的关系，为MELAS的诊断积累经验; 2.对MELAS线粒体基因突变分类研究，总结不同类型线粒体基因突变的临床表现、辅助检查特征。 方法: 1.病例选择 2003年1月至2014年6月因疑似为肌肉病而在我科行肌肉活检的1941例患者中，经临床表现、影像学特征、肌肉酶组织化学和电镜技术诊断为MELAS的患者35例，收集其相关临床资料。收集这些患者的人口学资料、临床症状与体征、个人史与家族史、相关辅助检查结果、肌肉酶组织化学结果等。 2.乳酸丙酮酸试验的方法 静态下取患者静脉血3ml，检测其乳酸和丙酮酸水平。对检测患者采取统一检测方法，即嘱患者平卧，一手卧住一个1kg重圆柱形容器，以最快速度反复做抬举-放下动作，直至不能再抬起手臂为止，即刻抽取运动侧手臂静脉血，运动后2分钟、5分钟、10分钟分别再次抽取运动侧手臂静脉血，测以上不同时间乳酸和丙酮酸水平。以运动前后乳酸）2.1mmol/L、丙酮酸）0.1mmol/L为异常标准。 3.肌肉酶组织化学检查方法 所有患者均在签署知情同意书后，予皮下局麻，选择病变肌肉或亚临床病变肌肉行肌活检取出肌肉组织，大小约为1×1×2(cm3)，用黄蓍胶将肌肉标本固定在软木拖上，立即放入液氮冷却的异戊烷中速冻;之后保存于-80℃低温冰箱。再于次日取出新鲜的肌肉组织块在冰冻切片机上切片，厚度为5μm;常规进行组织学和酶组织化学染色，包括:苏木精-伊红（HE）染色、改良Gomori染色(MGT)、三磷酸腺苷酶染色(ATPase)(pH为4.3、4.6、10.6、10.8)、琥珀酸脱氢酶染色(SDH)、ACP染色、糖原及糖原消化酶染色(PAS)、非特异性酯酶(NSE)染色、还原型辅酶Ⅰ染色(NADH-TR)、油红O染色(ORO)及苏丹黑(SBB)染色，光镜下观察并进行必要的照相。 4.对28例已确诊的MELAS患者用基因芯片技术筛查，对MELAS的线粒体基因突变进行筛查，总结不同线粒体基因突变临床特征、辅助检查、病理等特点。 结果: 1.MELAS患者临床表现多样，起病年龄集中于30岁以前，平均病程4.4年，起病方式包括急性、亚急性和慢性，疾病进展情况包括持续加重、反复发作和好转。最主要首发症状为癫痫发作(48.6％)，最主要临床表现则是癫痫发作(71.4％)、智能障碍(40％)、听力下降(34.3％)、肌肉无力(28.6％)等。MELAS患者肌酶轻至中度升高，且肌酶与病程、发病年龄明显相关，乳酸丙酮酸实验阳性率100％;肌电图可有多种表现形式，影像学则显示不同脑叶的异常信号。骨骼肌病理以Gomori染色发现RRF为特征性表现，电镜也能看到线粒体数量和形态的异常。 2.20例患者存在m.A3243G突变，余分别为m.A8433G突变、m.T3271C突变、m.T10191C突变、m.C14482T突变、m.G13513A突变各1例。其主要临床表现与全部35例MELAS患者表现类似，m.A3243G突变的比例与临床表现的严重程度不相关。m.T3271C突变、m.G13513A突变是MELAS的常见突变，m.A8433G突变为MELAS的少见突变，m.C14482T突变与m.A3243G共存于一个患者，表明可以同时两个以上线粒体突变存在于一个患者身上;m.T10191C突变是MELAS的新发现突变。 结论: 1.MELAS在本组肌活检的检出率为1.8％，可发生于不同年龄段，多以癫痫样发作和智能减退为首发表现，肌电图异常阳性率低，多数血清肌酶不高，但乳酸丙酮酸试验阳性率较高，影像学、肌肉酶组织化学和电镜技术有且于本病诊断。 2.MELAS常见基因突变为m.A3243G，占本组71.4％。 3.发现1例m.C14482T和m.A3243G同时突变，提示一个患者可同时出现两种以上突变，恰好能解释MELAS临床表现的异质性。 4.发现1例MELAS患者新的突变基因，即m.T10191C。