假基因Cripto-3在人大肠癌发生发展中的作用及机制探讨

来源 :江苏大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sweetlijun
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:   研究假基因Cripto-3在人大肠癌发生发展中的作用及机制探讨。   方法:   (1)收集36例住院病人的大肠癌组织标本,包括大肠癌组织和远端正常大肠组织,并记录下患者的临床病理资料。运用实时荧光定量PCR法检测组织标本中Cr-3mRNA的表达量。   (2)构建Cr-3基因的真核表达质粒转染人大肠癌HCT-116细胞,应用Cr-3小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)转染人大肠癌SW620细胞,分别采用MTT实验和平板克隆形成实验检测大肠癌细胞增殖能力,Transwell法检测大肠癌细胞的侵袭能力。   结果:   (1)实时荧光定量PCR法结果显示:在36例大肠癌组织中Cr-3高表达有27例(75.0%),而正常组织Cr-3基因mRNA表达极低,差异有统计学意义,(P<0.0001),并结合临床病理资料分析发现,Cr-3mRNA高表达与浆膜层侵袭、淋巴结转移和Dukes分期有关,差异有统计学意义(P均<0.05),而与患者性别、肿瘤发生部位和分化程度无关(P均>0.05)。   (2)在Cr-3真核表达质粒转染HCT-116细胞后,MTT结果显示:24h和48h时,3组细胞生长情况两两比较,差异无统计学意义(P>0.05);72h时Con-A组、Con-B组和Cr-3组相对增殖率分别为0.761±0.026、0.764±0.034和0.848±0.008(P<0.05);Cr-3组分别与Con-A组、Con-B组比较,细胞增殖能力明显增加(尸均<0.05);而Con-A组与Con-B组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。平板克隆形成实验结果显示:Con-A组、Con-B组和Cr-3组癌细胞克隆数分别为75±4、76±6和119±3(P<0.05);Cr-3分别与Con-A组、Con-B组比较,细胞克隆形成数明显增高,差异有统计学意义(P均<0.05);而Con-A组与Con-B组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Transwell实验结果显示:Con-A组、Con-B组和Cr-3组穿膜细胞数分别为44±4、45±5和76±6(P<0.05);Cr-3组分别与Con-A组、Con-B组比较,穿过滤膜的细胞明显增高,差异有统计学意义(P均<0.05);而Con-A组与Con-B组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。   (3)在Cr-3siRNA转染大肠癌SW620细胞后,MTT方法检测结果为:24h和48h时,3组细胞生长两两比较,差异无统计学意义(P>0.05);72h后,Con-A组、Con-B组和siRNA组相对增殖率分别为0.927±0.037、0.922±0.035和0.663±0.018(P<0.05);Cr-3siRNA转染组分别与Con-A组、Con-B组比较,细胞增殖能力明显下降,差异有统计学意义(P均<0.05);而Con-A组与Con-B组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。平板克隆形成实验结果显示,Con-A组、Con-B组和Cr-3siRNA转染组分别为56±3、53±4和12±3(P<0.05);Cr-3siRNA转染组分别与Con-A组、Con-B组比较,克隆形成数明显下降,差异有统计学意义(P均<0.05);而Con-A组与Con-B组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Transwell实验结果显示:Con-A组、Con-B组和Cr-3siRNA组穿膜细胞数分别为38±4、40±3和8±1(P<0.05),Cr-3siRNA转染组分别与Con-A组、Con-B组比较,穿膜细胞数明显下降,差异有统计学意义(P均<0.05);而Con-A组与Con-B组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。   结论:   本研究显示相对正常大肠组织,Cripto-3在大肠癌组织中表达上调,Cr-3mRNA的高表达与浆膜层侵袭、淋巴结转移和Dukes分期有关。Cripto-3真核表达质粒转染大肠癌HCT-116细胞后,显著增加了HCT-116细胞的增殖及侵袭能力。靶向沉默Cripto-3后,显著抑制了大肠癌SW620细胞增殖及侵袭能力。假基因Cripto-3在大肠癌发生发展中起到了重要的作用,它有望成为大肠癌临床诊断的一个检测指标,同时可能是大肠癌治疗过程中的一个重要靶点。
其他文献
玉米籽粒由于氨基酸成分不一致,特别是赖氨酸和色氨酸含量少,其生物学价值很低。这同占籽粒蛋白总量30—60%的主要的贮藏蛋白质——玉米胶蛋白中缺乏这些氨基酸有关。玉米胶
由红外线测温仪、PC286微机组成的温度连续采集及数据处理系统,应用于重轨全长温度测试系统中,效果良好。 By infrared thermometer, PC286 microcomputer temperature continuous
目的:   1、应用构建的水痘-带状疱疹病毒(VZV)报告细胞系MV9G进一步研究白黎芦醇体外抑制VZV的作用机制。   2、进一步验证应用VZV报告细胞MV9G筛选抗VZV药物并研究其
在人类栽培作物的长期实践和许多研究中,关于营养液中营养元素的比例对作物产量的影响,大概由于研究方法不同,故结论不尽相同。为此,作者采用美国育成的矮秆春麦品种维尔得
山西省种植甜菜已有二十多年的历史。多年来由于没有适宜山西省种植的品种,因而甜菜产量一直不高不稳。为了培育适宜山西省种植的甜菜品种,大同糖厂甜菜育种试验站经过十多
花生是我区的主要油料作物,面积总产居全省首位。1980年总产达一亿九千三百二十万斤,除上调省外,全区人口年均花生食油3斤多。但是,花生生产还远远不能满足人民的需要,我们必
温室和田间试验表明,在开花前花生叶片Zu和B的浓度增加,且产量随着2.5公斤/公顷的Zn和1公斤/公顷B而增加。文章提出种植在旁遮普地区花生叶片中Zn和B的邻界值为25ppm,采用B+Z
1977年起,我们开展了~(60)Coγ射线辐射在水稻花药单倍体育种中应用的研究.现将有关辐射处理对诱导率、分化率和花粉苗株生长发育的影响报告如下:一、材料和方法供试材料,19
报道一种新的用生物传感器测定D-葡萄糖互变系数的方法.该生物传感器由固定葡萄糖氧化酶酶膜和流动注入分析式氧电极所组成.传感器测得的互变系数与旋光法测定的和文献上所给
多穗玉米是一种粮、饲兼用的分蘖多穗玉米,它每株能结三至七个穗,经大面积试种,最高亩产可达二千斤,且能在盐碱地上种植。这种多穗玉米,是由中国科学院遗传研究所已故工程师