【摘 要】
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本试验旨在研究包膜丁酸钠(CSB)对脂多糖(LPS)刺激下断奶羔羊肠道损伤的调控作用。试验选取(42±1)日龄、平均体重为(11.79±0.54)kg的断奶羔羊24只,按体重相近原则将其随机分为4组:空白组(CON组)、脂多糖组(LPS组)、2 g/kg CSB组(CSB2L组)、3 g/kg CSB组(CSB3L组),每组6个重复,每个重复1只羊,在试验第28 d每组选取3只进行屠宰。CON和L
【基金项目】
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黑龙江省自然科学基金联合项目(LH2019C053);
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本试验旨在研究包膜丁酸钠(CSB)对脂多糖(LPS)刺激下断奶羔羊肠道损伤的调控作用。试验选取(42±1)日龄、平均体重为(11.79±0.54)kg的断奶羔羊24只,按体重相近原则将其随机分为4组:空白组(CON组)、脂多糖组(LPS组)、2 g/kg CSB组(CSB2L组)、3 g/kg CSB组(CSB3L组),每组6个重复,每个重复1只羊,在试验第28 d每组选取3只进行屠宰。CON和LPS组饲喂基础日粮,CSB2L和CSB3L组在基础日粮中分别添加2和3 g/kg CSB,其中LPS、CSB2L和CSB3L组在试验第28 d屠宰前3 h腹腔注射100μg/kg BW LPS,CON组腹腔注射等量无菌生理盐水。研究结果表明:(1)CSB对LPS刺激下断奶羔羊肠道物理屏障的影响注射LPS后,空肠和回肠绒毛排列紊乱,绒毛肿胀脱落。CSB2L和CSB3L组的空肠和回肠绒毛较为完整且排列整齐,肿胀程度降低,上皮轻度脱落。LPS刺激显著降低羔羊空肠和回肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度(P<0.05);CSB2L和CSB3L组空肠和回肠绒毛高度降低和绒毛高度/隐窝深度降低均得到缓解(P<0.05)。血清中DLA和DAO活性在LPS刺激下显著升高(P<0.05);CSB2L和CSB3L组可显著降低LPS注射后的血清DLA含量和DAO活性(P<0.05)。LPS组回肠的Claudin-3、ZO-1和Occludin蛋白表达水平显著低于CON组(P<0.05);CSB2L和CSB3L组回肠中Claudin-3、Occluding和ZO-1的蛋白表达水平显著高于LPS组(P<0.05)。与CON组相比,LPS组断奶羔羊小肠中的杯状细胞数量显著下降(P<0.05);与LPS组相比,除CSB2L组的十二指肠和空肠外,CSB2L组回肠和CSB3L组羔羊十二指肠、空肠、回肠杯状细胞数量均显著增加(P<0.05)。LPS组回肠组织MUC2的m RNA表达量显著低于CON组(P<0.05);与LPS组相比,CSB2L和CSB3L组MUC2的m RNA表达量显著升高(P<0.05)。(2)CSB对LPS刺激下断奶羔羊血清炎性因子及肠道TLR4/My D88/NF-κB信号通路的调控与CON组相比,LPS组断奶羔羊血清中TNF-α、IL-1β和IL-8含量显著升高(P<0.05);与LPS组相比,CSB2L和CSB3L组TNF-α和IL-1β含量(P<0.05),CSB2L和CSB3L组血清IL-10含量显著升高(P<0.05)。LPS刺激显著增加了回肠My D88、TLR4和NF-κB以及IL-6、IL-1β的m RNA表达(P<0.05);与LPS组相比,CSB组这些基因的表达水平降低(P<0.05)。与CON组相比,LPS刺激显著升高回肠中TLR4、My D88的蛋白表达水平和NF-κBp65信号通路的磷酸化水平(P<0.05);与LPS组相比,CSB组显著抑制TLR4、My D88的蛋白表达和NF-κBp65的磷酸化水平(P<0.05)。(3)CSB对LPS刺激下断奶羔羊肠道微生物及VFA浓度的影响LPS刺激会降低盲肠和结肠微生物的OTU数,CSB的添加可在一定程度上提高结肠的O TU数,且以3 g/kg独特性更强。CSB的添加提高盲肠和结肠菌群的丰富度(P<0.05),对结肠多样性无显著影响(P>0.05)。CSB对盲肠和结肠的门水平影响不大,各组主要菌门类似;LPS刺激会显著降低Tenericutes的相对丰度(P<0.05),CSB的添加组与CON组相比无显著变化(P>0.05)。在属水平,CSB的添加主要会缓解LPS刺激对Ruminococcaceae_UCG-010、Ruminococcaceae_NK4A214_group、[Eubacterium]_coprostanoligenes_group、norank_f__nor ank_o__Mollicutes_RF39相对丰度的降低和Negativibacillus、norank_f__Barnesiellaceae相对丰度的升高。LPS刺激后,断奶羔羊回肠丁酸和TVFA浓度显著下降(P<0.05);与LPS组相比,CSB2L组回肠TVFA浓度显著升高(P<0.05),CSB2L组丁酸差异不显著(P>0.05),C SB3L组丁酸和TVFA浓度显著升高(P<0.05)。结肠细菌属与VFA相关性分析表明Lysinibac illus、Campylobacter和unclassified_f__Lachnospiraceae与丙酸和TVFA呈显著负相关,Rumi nococcaceae和Candidatus_Soleaferrea与结肠VFA浓度呈正相关。结论:补充2种剂量的CSB均可以改善LPS应激导致的断奶羔羊的肠道损伤、维持肠道稳态,影响基本一致。
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