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乳腺分泌型上皮细胞是乳腺中唯一能够合成、分泌乳汁的细胞，山羊的泌乳在整个泌乳期具有规律性，体外培养的山羊乳腺上皮细胞是研究乳腺泌乳功能的重要工具。IGFBP5作为一个调控细胞生长和发育等过程的主要调控因子，在山羊乳腺上皮细胞中同样起到至关重要的作用。microRNA作为一类长度约22nt的单链内源性非编码小RNA分子，在动物体内进化过程中具有高度保守性和时空特异性，并能在转录后水平调控其靶mRNA的表达，广泛参与细胞的增殖凋亡、分化和器官发育等一系列生物学过程以及调控生理和病理过程。miRNA在乳腺生长发育过程中呈现差异性表达，是乳腺发育与泌乳的重要调控因子。 本研究首先利用生物信息学软件预测可能靶控IGFBP5的miRNA，利用实验室前期培养的山羊乳腺分泌型上皮细胞系以及293T细胞系，通过双荧光素酶报告基因，qRT-PCR鉴定IGFBP5与预测的miRNA之间的靶向关系，采用MTT、FCM检测miRNA对山羊乳腺上皮细胞增殖凋亡的调控情况。主要研究结果如下： （1）从生物信息学软件预测可能靶控IGFBP5的miRNA中筛选出miR-203a-3p和miR-139-5p。 （2）双荧光素酶报告基因结果显示：共转染miR-203a-3p mimic和psiCHECK2-IGFBP5-Wt-3’UTR荧光报告基因载体，其荧光素酶活性显著低于其突变型载体的共转染组(P＜0.05)，同时极显著低于miR-203a-3p NC和psiCHECK2-IGFBP5-Wt/Mut-3’UTR共转染组(P＜0.01)；共转染miR-139-5p mimic和psiCHECK2-IGFBP5-Wt-3’UTR荧光报告基因载体，其荧光素酶活性极显著低于其突变型载体共转染组以及miR-139-5p NC和psiCHECK2-IGFBP5-Wt/Mut-3’UTR的共转染组(P＜0.01)。 （3）qRT-PCR结果显示：转染miR-203a-3p mimic的细胞中，IGFBP5基因的表达量极显著低于对照转染组，miR-203a-3p inhibitor转染组低于对照转染组中IGFBP5的表达量，高于miR-203a-3p mimic转染组中IGFBP5基因的表达量，但均并未达到显著水平；转染miR-139-5p mimic的细胞中，IGFBP5基因的表达量显著低于对照转染组，miR-139-5p inhibitor转染组低于对照转染组中IGFBP5的表达量，高于miR-139-5p mimic 转染组中IGFBP5基因表达量，但均未达到显著水平。 （4）MTT结果显示：miR-203a-3p mimic、inhibitor转染组与miR-203a-3p control转染组在转染0h和转染48h时仪器吸光度值差异不显著，转染24h时进行吸光度值检测发现，miR-203a-3p inhibitor转染组吸光度值要极显著高于miR-203a-3p mimic、control转染组(P＜0.01)，miR-203a-3p mimic转染组比miR-203a-3p control转染组要低但并未达到显著水平；miR-139-5p mimic转染组与miR-139-5p inhibitor、control转染组在转染0h和48h时仪器吸光度值差异不显著。转染24h时进行吸光度值检测发现，miR-139-5p inhibitor转染组吸光度值要显著高于miR-139-5p control转染组(P＜0.05)，miR-139-5p mimic转染组比miR-139-5p control转染组要低但未达到显著水平。 （5）FCM结果显示：miR-203a-3p inhibitor转染组细胞凋亡率要显著低于miR-203a-3p control转染组(P＜0.05)，miR-203a-3p mimic转染组和miR-203a-3p control转染组并无显著性差异；miR-139-5p inhibitor、mimic转染组细胞凋亡率均低于miR-139-5p control转染组，但并未达到显著水平。 综上所述，miR-203a-3p和miR-139-5p过表达后在山羊乳腺上皮细胞中均下调IGFBP5基因的表达，miR-203a-3p和miR-139-5p抑制表达后均促进山羊乳腺上皮细胞的增殖。