HSP90抑制剂IPI-504影响胃癌细胞及其干细胞样细胞功能的研究

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目的探讨特异性热休克蛋白90(Heat Shock Protein 90,HSP90)抑制剂盐酸瑞它霉素(Retaspimycin Hydrochloride,IPI-504)对人胃癌细胞SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干细胞样细胞的增殖、迁移、侵袭及凋亡等影响及机制。材料与方法应用流式细胞仪检测及分选SGC-7901、NCI-N87中干细胞样细胞;应用MTT比色法检测不同浓度IPI-504对SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干细胞样细胞的生长抑制率;应用平板克隆形成实验检测不同浓度IPI-504对SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干细胞样细胞的克隆形成能力;应用划痕实验及Transwell侵袭实验检测IPI-504对SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干细胞样细胞迁移及侵袭力;应用流式细胞仪检测IPI-504对SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干细胞样细胞凋亡率的影响;应用q RT-PCR及Western Blot技术检测IPI-504对SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干细胞样细胞的中的EGFR及HER-2 m RNA及蛋白表达的影响。结果(1)从人胃癌细胞系SGC-7901、NCI-N87分选出8%和6%的CD44+干细胞样细胞,阳性率>95%。(2)IPI-504能显著抑制SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干细胞样细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力,并且增加以上细胞的凋亡率,且呈剂量依赖性。(3)IPI-504能显著抑制SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干细胞样细胞中HSP90的表达,呈剂量依赖性;此外,IPI-504能显著抑制SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干细胞样细胞中EGFR及HER-2 m RNA及蛋白表达。结论IPI-504通过抑制人胃癌细胞SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干细胞样细胞中HSP90的表达进而下调EGFR及HER-2的表达,能够显著抑制胃癌细胞SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干细胞样细胞的增殖、迁移、侵袭能力,并促使其凋亡。
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